[发明专利]由携带嵌合CD4受体的细胞针对HIV感染细胞的细胞溶解作用

说明书

本发明是遵从国家卫生组织签发的#AI27849合同，在政府资助下完成的。政府对本发明享有一定权利。

本发明涉及能指导免疫细胞溶解HIV感染细胞，而不使免疫细胞对HIV感染敏感的CD4片段和免疫细胞受体之间的功能性嵌合体，因此本发明提供新的有效HIV治疗法。

通过T细胞受体进行的抗原T细胞识别作用，是一些免疫学现象之基础。所述T细胞指导所谓的细胞介导的免疫。该作用包括借助免疫系统细胞来破坏外来组织或受感染细胞。存在各种不同T细胞，包括“辅助”细胞及“抑制”细胞，这些细胞可调节免疫反应，和细胞毒(或“杀死”)细胞，它可直接杀死不正常细胞。

T细胞识别和结合另一细胞表面上显示的独特抗原后被激活，然后可倍增，并且，如果它是细胞毒性细胞，便可杀死该结合细胞。

HIV和免疫发病机理

1984年发现HIV是爱滋病的病原剂。自那时起，有关爱滋病的定义，就其在诊断中涉及何种标准的问题已作过多次修改。然而尽管诊断参数不一，但爱滋病的简单共同特征是HIV感染，和随后的持续性全身症状出现，以及仅限于爱滋病的疾患，例如继发性感染，肿瘤，神经疾病等。见Harrison的内脏医学原理，第十二版(Principles ofInternal Medicine，12th ed.)，McGrawHill(1991)。

HIV是慢病毒属(1entivirus)的人反转录病毒。四种已识别的人反转录病毒分属于两不同类：人T嗜淋巴性(或白血病)反转录病毒，HTLV-1和HTLV-2，和人免疫缺损病毒HIV-1和HIV-2。前者是转化病毒，而后者是细胞病病毒。

HIV-1是被鉴定为全世界最共同的爱滋病病因。HIV-1和HIV-2之间的同源性约为40％，同时HIV-2更为接近猿免疫缺损病毒(SIV)族的某些病毒。见Curran，J.等人，科学(Science )，329：1357-1359(1985)；Weiss，R.等人，自然(Nature，324：572-575(1986)。

HIV有通常的反转录病毒基因(env，agag和pol)以及涉及复制和病毒其它生物活性的另外六个基因。正如前面所述，爱滋病的共同特征是明显的免疫抑制作用，最为重要的是对细胞介导的免疫性的抑制作用。此种免疫抑制导致了各种机会致病菌引起的疾病，特别是某些感染和肿瘤。

爱滋病免疫缺损的主要原因，经鉴定是由于胸腺衍生的(T)淋巴细胞亚群T4群体，在数量和质量上的缺损。从CD4表面分子的存在，来从表型上定义此种细胞亚群，所述CD4表面分子，被证明是HIV的细胞受体。见Dalgleish等人，自然312：763(1984)。虽然T4细胞是受HIV感染的主要细胞类型，但基本上在其表面表达CD4分子的任何人细胞均能与HIV结合并受其感染。

传统上认为，CD4⁺T细胞起辅助因子/诱导因子的作用，在对B细胞提供激活信号，或诱导携载交互CD8标志的T淋巴细胞，使其变成胞毒性/抑制细胞方面发挥功能。见Reinherz和Schlossman，细胞(Cell)，19：821-827(1980)；Goldstein等人，免疫学评论(Immunol.Rev.)68：5-42(1982)。

借助病毒被膜(gp 120)中的一段氨基酸，HIV与靠近CD4分子N-末端的V1区域的一部分进行特异性结合，并且其亲和性极高。结合之后，该病毒与靶细胞膜融合，并进入其中。一旦进入其中，它便使用逆转录酶，使其基因组RNA转录成DNA，该DNA整合进细胞DNA中，在其中，该病毒以原病毒”的方式存在于细胞的整个生命期。

该“原病毒”可保持潜伏，或者被激活转录mRNA或基因组RNA，导致蛋白合成，组装，新的病毒核粒子形成，并使病毒从细胞表面萌生。虽然病毒诱导细胞死亡的准确机理尚无定论，但已确信主要的机理是大量的病毒从细胞表面萌生，导致胞质膜破裂并引起渗透失衡。

感染过程中，宿主机体便产生抗病毒蛋白的抗体，包括抗主要被膜糖蛋白gp120和gp41的抗体。尽管存在该体液免疫，疾病仍进一步发展，结果产生以多发性机会致病菌感染、寄生物血症、疾呆和死亡为特征的致命性免疫抑制作用。宿主抗病毒抗体对控制该病无能为力，这表明了该感染最为令人苦脑和使人恐慌，并且预示着根据常规方法采用免疫接种将无济于事。