[发明专利]编码肿瘤排斥抗原前体DAGE的分离的核酸分子及其应用

说明书

相关申请

本申请是申请号为08/316,231，申请日为1994年9月30日的申请的部分继续申请，其公开的内容本文一并参考。

发明所属技术领域

本发明涉及编码肿瘤排斥抗原前体的核酸分子，更具体地说，本发明涉及这样的基因，其肿瘤排斥抗原前体被加工成至少一种由HLA-A24分子呈递的肿瘤排斥抗原。所说的肿瘤排斥抗原前体，或＂TRAP＂可以被加工成由其他MHC分子(如HLA-A1和其等位体，HLA-A2,HLA-Cw°1601,HLA-B44等)呈递的附加肽。所说的基因显示出不与其它已知肿瘤排斥抗原前体编码序列相关，被各种肿瘤表达，并且除了睾丸，卵巢和子宫内膜细胞外，不被正常细胞表达。

发明背景和现有技术

哺乳动物免疫系统识别外源物质和与外源物质反应的过程是一个复杂过程。该系统的的一个重要方面是T淋巴细胞，或＂T细胞＂应答。该应答要求T细胞识别细胞表面分子(称作人类白细胞抗原(＂HLA＂)，或主要组织相容性复合物(“MHCs”))和肽的复合物并与其相互作用。所说的肽类是由也呈递HLA/MHC分子的细胞加工从较大分子衍生的，这一点参见Male等，高等免疫学(J.P.Lipincott公司，1987),6-10章。T细胞和HLA/肽复合物的相互作用是受到限制的，要求T细胞对HLA分子和肽的特定组合是特异性的。如果特异性T细胞不存在，即使它的配体复合物存在，也没有细胞应答。同样地，如果特异性复合物不存在，仅T细胞存在也没有应答。这种机制涉及到在自身免疫病理学中和细胞异常反应中的免疫系统对外源物质的应答。许多工作曾集中于蛋白质加工成HLA结合肽的机制上。在这一点上，参见，Bannaga，科学257:880(1992)；Fremont等，科学257:919(1992)；Matsumura等，科学257:927(1992)；Latron等，科学257:964(1992)。

T细胞识别细胞异常的机制也牵涉进癌中。例如，在PCT申请PCTUS/92/04354(申请日1992年5月22日，公开日1992年11月26日，本文一并参考)中公开了一族基因，它们被加工成肽，所述肽其后依次在细胞表面上表达，导致肿瘤细胞被特异性CTLs胞溶性T淋巴细胞，或以下称“CTLs”溶解。所说的基因被认为编码＂肿瘤排斥抗原前体＂或＂TRAP＂分子，其肽衍生物被称作“肿瘤排斥抗原”或＂TRAs＂，参见Traversari等，免疫遗传学35:145(1992)；vanderBruggen等，科学254:1643(1991)，有关这个基因族的其它信息，也参见美国专利5,342,774(申请号807,043，申请日1991年12月12日，本文一并参考)。这一专利中公开了肿瘤排斥抗原前体“MAGE”族。

美国专利5,405,940(申请号938,334其公开的内容本文一并参考)阐述了编码肿瘤排斥抗原前体的MAGE-Ⅰ基因，所述前体被加工成由HLA-A1分子呈递的九肽(nonapeptides)。结合到HLA-A1上的九肽遵循基序适合的结合“规则”。这一点，参见例如PCT/US93/07421；Falk等，自然351:290-296(1991)；Engelhard，免疫学年度回顾，12:181-207(1994)；Ruppert等，细胞74:929-937(1993)；Rotzschke等，自然348:252-254(1990)；Bjorkm等，自然329:512-518(1987)；Traversari等，实验医学杂志176:1453-1457(1992)。这些参考文献教导了假定已知特定肽对特定HLA分子的特异性，人们应预期结合到一种HLA分子上(而不是其它分子上)的特定肽，这一点是重要的，因为不同的个体具有不同的HLA表型。结果，经管鉴别作为特异性HLA分子的配体的特定肽具有诊断的和治疗用途，但这些仅仅与具有该特定的HLA表型的个体相关。在这一领域需要作进一步的工作，因为细胞异常不限于一种特定的HLA表型，定向疗法需要一些异常细胞表型的知识。

美国专利申请008,446(申请日1993年1月22日，本文一并参考)描述了MAGE-1表达产物被加工成第二种TRA的事实。这一第二种TRA由HLA-Cw°1601分子呈递。这一公开表明给定的TRAP能产生许多TRA，每一种都符合结合到MHC分子上的基序规则。

美国专利申请994,928(申请日1992年12月12日，本文一并参考)阐述了酪氨酸酶，即一种由一些正常细胞(例如，黑素细胞)产生的分子，在肿瘤细胞中被加工成由HLA-A2分子呈递的肽。