[发明专利]人血管内皮生长因子3

说明书

本发明涉及新鉴定的多核苷酸，该多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸和多肽的用途以及该多核苷酸和多肽的生产。本发明的多肽已鉴定为血管内皮生长因子家族的一个成员，更具体地，本发明的多肽为血管内皮生长因子3，在下文中有时称作“VEGF3”。本发明也涉及抑制该多肽的作用。

新血管的形成或称血管生成对于胚胎发育、后续的生长以及组织修复是非常重要的，然而血管生成也是某些病理状态如瘤形成(例如肿瘤和神经胶质瘤)的重要部分，异常血管生成与其它一些疾病相关，如炎症、风湿性关节炎、银屑病和糖尿病性视网膜病(Folkman，J.and Klagsbrun，M.，科学235：442-447(1987))。

酸性和碱性成纤维细胞生长因子分子均是内皮细胞和其它细胞的促分裂原。尽管血管趋向肽(angiotropin)和血管生成素的功能尚不清楚，但是它们可以诱导血管生成(Folkman，J.，1993，癌症药物，153-170页，Lea and Febiger出版社)。血管内皮细胞的一种高度选择性促分裂原是血管内皮生长因子或称VEGF(Ferrara，N.等，内分泌综述13：19-32(1992))，其也称为血管通透因子(VPF)，血管内皮生长因子是分泌的血管生成促分裂原，其靶细胞特异性似乎限于血管内皮细胞。

已鉴别了小鼠VEGF基因并分析了其在胚胎发生中的表达模式。在邻近透明内皮的上皮细胞中，例如在脉络膜丛和肾小球中观察到VEGF的持续表达。该资料与VEGF是内皮细胞生长和分化的多功能调节物的作用一致(Breier，G.等，发育114：521-532(1992))。

VEGF在结构上与血小板衍生生长因子(PDGF)和胎盘生长因子(PLGF)的α和β链相关，PDGF是间质细胞的促分裂原，PLGF是内皮细胞的促分裂原。这三个蛋白属于同一家族并共享一保守基序，在这些蛋白中负责形成二硫键的8个半胱氨酸严格保守。已鉴别了VEGF、PLGF和PDGF的可变剪接mRNA，这些不同的剪接产物的生物学活性和受体结合特异性不同。VEGF和PDGF以同二聚体或异二聚体起作用并结合受体，这些受体在二聚化后激发内在的酪氨酸激酶活性。

由于可变剪接，VEGF具有4种不同形式，分别含121、165、189和206个氨基酸，VEGF121和VEGF165是可溶的并能促进血管生成，而VEGF189和VEGF306与细胞表面的含有肝素的蛋白聚糖结合。VEGF的时空表达已证明与血管的生理性增殖相关(Gajdusek，C.M.and Carbon，S.J.，细胞生理学139：570-579(1989)；McNeil，P.L.，Muthukrishnan，L.，Warder，E.，D’Amore，P.A.，细胞生物学杂志109：811-822(1989))。其高亲和性结合位点只位于组织切片中的内皮细胞(Jakeman，L.B.等，临床研究89：244-253(1989))。所述的因子可以从垂体细胞和几种肿瘤细胞系中分离并已用于某些人神经胶质瘤(Plate，K.H.，自然359：845-848(1992))。令人感兴趣的是VEGF121或VEGF165的表达赋予中国仓鼠卵巢细胞以在裸鼠中形成肿瘤的能力(Ferrara，N.等，临床研究杂志91：160-170(1993))。已证明用抗VEGF单克隆抗体对VEGF的抑制可以在免疫缺陷的小鼠中抑制肿瘤生长(Kim，K.J.，自然362：841-844(1993))。另外，VEGF受体的一种显性阴性突变体已证明能抑制小鼠中的成神经细胞瘤的生长。

已发现血管通透因子负责甚至在损伤停止后仍持续的对于细胞质蛋白的微血管高通透性，这是正常伤口愈合的一个特征，提示VPF是伤口愈合中的一个重要因子，Brown，L.F.等，实验医学杂志176：1375-9(1992)。

VEGF在血管化组织(例如肺、心脏、胎盘和实体肿瘤)中的表达很高并与血管生成在时间和空间上相关。还证明VEGF能在体内诱导血管生成。由于血管生成对于正常组织特别是血管组织的修复很重要，所以VEGF已被提议用于促进血管组织修复(例如在动脉粥样硬化中)。