[发明专利]丝氨酰组氨酸、磷酰化丝氨酸、磷酰化苏氨酸用作核酸切割剂

权利要求书

1、一种将丝氨酰组氨酸作为核酸切割剂的用途，其特征在于被切割的核酸为DNA或RNA，其切割过程为：将丝氨酰组氨酸溶于无菌高纯水，配成溶液，将此溶液与被切割的核酸即切割底物混合，切割底物为双链线状DNA、超螺旋质粒DNA和RNA，以20mM(毫摩尔/升)的伯瑞坦-罗比森(Britton-Robison)，由磷酸、乙酸、硼酸组成，其浓度分别为0.04M缓冲液作为缓冲体系，用氢氧化钠调pH值在4.0-9.0的范围，丝氨酰组氨酸的终浓度为-200毫摩尔/升(mM)，底物的终浓度为0.05-50mM(按单个碱基的浓度计算)，将丝氨酰组氨酸与底物的混合物置于10-80℃下保温，保温0-96h取出，即完成对底物的切割。

2、一种将磷酰化丝氨酸、磷酰化苏氨酸作为核酸切割剂的用途，其特征在于被切割的核酸为DNA域RNA，割剂磷酰化丝氨酸为N-O,O-二异丙基磷酰化丝氨酸(DIPP-Ser)、N-O,O-二正丁基磷酰化丝氨酸(DBP-Ser)和N-O,O-二甲基磷酰化丝氨酸(DMP-Ser)，割剂磷酰化苏氨酸为N-O,O-二异丙基磷酰化苏氨酸(DIPP-Thr)和N-O,O-二正丁基磷酰化苏氨酸(DBP-Thr)，其切割过程为：用无菌高纯水配制浓度为280mM的饱和组氨酸溶液，将切割剂即磷酰化丝氨酸、磷酰化苏氨酸溶于其中，配成溶液，然后将该溶液与被切割的核酸即切割底物混合，切割底物为双链线状DNA、超螺旋质粒DNA和RNA，以组氨酸作为缓冲体系，将pH值调整在7.5左右，组氨酸缓冲液的浓度范围为10-280mM，切割剂的终浓度为0.5-200mM，底物的终浓度为0.05-50mM(按单个碱基的浓度计算)，最后将切割剂、组氨酸与底物的混合物置于10-80℃下保温，保温0-96h取出即完成底物切割。