[发明专利]一种利用竹荪深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体的方法

说明书

竹荪营养菌丝体的方法

本发明涉及生化工程领域，提供一种竹荪菌的生产方法。具体地说是利用竹荪深层发酵获得的菌丝体为原料，经复合酶解作用使其有效养分及活性物质易被人体吸收，该竹荪粉中除菌丝体水溶性成分外，还包括非溶水部分和培养液中游离氨基酸等。

竹荪为一种名贵的食药用真菌，其竹荪保健饮品及调味品生产均以其子实体为原料，成本较高，主要是采用子实体的浸泡、水煮或醇提等方法，加一些中草药成分配制成多种原料组成的饮品、保健酒或加入到调味品之中制成竹荪调味品。也有报导以香茹、金针菇和竹荪固体发酵菌丝体，加绞骨兰和麦芽粉为原料，混合提取后经压榨、过滤制成，为一种水提复合液。然而，该方法固体培养基(以棉子壳为主)中的三种菌丝体成分难以充分获得，水提液中混杂有棉子壳及麸皮等的水提物。至今尚未发现利用深层发酵技术来获得菌丝体及以菌丝为原料，生产各种竹荪保健品的报导。本发明的目的提供一种生产竹荪成分的生化方法。

本发明的生产竹荪粉的方法是利用深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体，结合复合酶解作用，形成纯竹荪成分组成并易被人体所吸收的全营养竹荪粉。具体地说本发明的工艺过程为：

1．深层发酵培养竹荪菌株：

取竹荪菌株接种于培养瓶中，于培养基液体中进行摇床振荡培养，培养基的组成为：土豆浸汁10～20％M／V，蛋白胨0．1～1％，葡萄糖1～10％，KH₂PO₄ 0．01～0．1％，MgSO₄ 0．01～0．1％，NaCl 0．005～0．1％，其余为水。摇瓶培养于20～30℃下，以30～80rmp／分速度进行1～10小时。并以此液体菌种再用相同培养基进行瓶培养1～10日。

将上述培养后菌种接种于发酵罐内进行发酵培养，其培养液为黄豆饼粉5～15％，蛋白胨0．1～1％，酵母粉0．01～0．5％，玉米浆0．01～0．5％，蔗糖1～5％，玉米粉1～5％，KH₂PO₄ 0．01～0．5％，MgSO₄ 0．01～0．1％，NaCl 0．05～0．1％。搅拌速度为50～150rmp／分，培养1～10日后离心分离出菌体。

2．复合酶降解竹荪菌：

将收集到的菌丝体，移到复合酶解液中于35～50℃下振荡反应1～10小时，完成酶解过程，复合酶可用溶菌酶，蛋白酶、纤维素酶或半纤维素酶中两种或多种混合酶菌。复合酶解液的调配采用常规技术用稀MgSO₄溶液加入酶菌配制而成，酶菌的含量为酶解液的1～8％。

3．经酶解后的酶解混合液可按常规技术浓缩或直接制成含竹荪的生物制品。

下面通过实例对本发明的技术给予进一步的说明。

实例1

将斜面竹荪菌株接种于250ml三角瓶液体培养基(土豆浸汁20％M／V、蛋白胨0．2％、葡萄糖2％、KH₂PO₄ 0．05％、MgSO₄0．05％、NaCl 0．01％)100ml，待菌丝展开生长后，摇床振荡培养(80rmp／min)，并以此为液体菌种再进行三角瓶液体培养(20℃144hr)后接种于5立升气升式全自动发酵罐液体培养液(黄豆饼粉10％、蛋白胨0．3％、酵母粉0．2％、玉米浆0．1％、蔗糖2％、玉米粉1．5％、KH₂PO₄ 0．1％、MgSO₄ 0．05％、NaCl 0．01％)，通气量0．8～1．0V／V／M，搅拌速度120rmp／min，培养七天后离心将菌体移入复合酶解液(0．6M MgSO₄配制纤维素酶1％、半纤维素酶1％、溶菌酶0．5％、蛋白酶1％)，40℃振荡反应5小时后，同滤菌上清液一起浓缩，之后经喷雾干燥、灭菌即得全营养竹荪粉。

由上述实例，本发明技术的特点是采用可工业化生产的深层发酵技术，生产竹荪营养菌丝体并利用复合酶降解菌丝体蛋白，释放细胞内有效成分，制成易被人体所吸收的纯竹荪粉。