[发明专利]表达胆汁盐刺激脂酶(BSSL)的DNA分子

权利要求书

1.一种DNA分子，包括

(a)编码为人BSSL或其生物活性变异体的多肽的区域；

(b)与所述多肽编码区的5′末端相连的，编码能操纵所述多肽从用所述DNA分子转化的巴斯德毕赤酵母细胞分泌的信号肽的区域；

(c)可操作性地与(a)和(b)中定义的所述编码区相连的巴斯德毕赤酵母的甲醇氧化酶启动子或功能相同的启动子。

2.根据权利要求1的DNA分子，其中所述信号肽与序列表中SEQ IDNO：2的氨基酸-20至-1所示的氨基酸序列相同或基本类似。

3.根据权利要求1的DNA分子，其中所述信号肽包含啤酒糖酵母转化酶信号肽。

4.根据权利要求1-3任一项的编码人BSSL生物活性变异体的DNA分子，其中缺失至少一个11个氨基酸的重复单元，所述重复单元示于SEQ ID NO：1中。

5.根据权利要求1-4任一项的DNA分子，其编码具有BSSL活性并具有与SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4的序列存在至少95％同源性的氨基酸序列的多肽。

6.根据权利要求1-5任一项的DNA分子，其编码具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4的氨基酸序列的多肽。

7.一种载体，包含根据权利要求1-6任一项的DNA分子。

8.根据权利要求7的可复制表达载体，它能介导巴斯德毕赤酵母细胞中人BSSL或其生物活性变异体的表达。

9.根据权利要求8的载体，其为质粒载体pARC 5771(NCIMB40721)，pARC 5799(NCIMB，40723)或pARC 5797(NCIMB40722)。

10.用根据权利要求7-9任一项的载体转化的毕赤酵母属的宿主细胞。

11.根据权利要求10的宿主细胞，为巴斯德毕赤酵母细胞。

12.根据权利要求11的宿主细胞，巴斯德毕赤酵母细胞GS115株。

13.根据权利要求12的宿主细胞，为PPF-1[pARC 5771](NCIMB40721)，GS115[pARC 5799](NCIMB 40723)或GS115[pARC 5797](NCIMB 40722)。

14.一种制备人BSSL或其生物活性变异体的多肽的方法，包括在使所述多肽分泌到培养基中的条件下培养根据权利要求10-13任一项的宿主细胞，并从培养基中回收所述多肽。