[发明专利]诱发猪生殖和呼吸综合征(PRRS)的病毒的新的减毒株,由其产生的疫苗和诊断试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.诱发被称作猪生殖和呼吸综合征(PRRS)的猪病的病毒的减毒株，它基本上与95年11月23日保藏于巴斯德研究所CNCM的保藏号为I-1642的保藏物一致。

2.一种保护猪免于被称作猪生殖和呼吸综合征(PRRS)的疾病的疫苗，其特征在于：该疫苗包含权利要求1的病毒株和/或至少一种可由它得到的病毒性抗原。

3.权利要求2的疫苗，其中病毒性抗原是灭活的病毒。

4.权利要求2的疫苗，其特征在于：该疫苗包含10²-10⁶TCID₅₀的减毒病毒株。

5.权利要求2或3的疫苗，其中疫苗剂量包含一定的病毒性抗原量，该病毒性抗原量与10²-10⁶TCID₅₀的减毒病毒株所产生的量相等。

6.权利要求2-5中任一权项的疫苗，其特征在于：该疫苗包含附加的免疫刺激性佐剂和/或乳化剂和/或稳定剂。

7.权利要求2-6中任一权项的疫苗，其特征在于：该疫苗以单独或组合的形式包含附加的活的或灭活的猪病毒。

8.权利要求2-6中任一权项的疫苗，其特征在于：该疫苗包含附加的活的或灭活的细菌。

9.来源于稳定的猴肾细胞系MA-104的细胞克隆，它基本上与95年11月23日保藏于巴斯德研究所CNCM的保藏号为I-1643的保藏物一致。

10.一种获得PRRS病毒的减毒株的方法，其特征在于：该方法主要包括通过在权利要求9的细胞克隆中连续传代而对毒性株进行修饰。

11.权利要求10的方法，其特征在于：在连续传代中温度保持在34℃。

12.一种制备抗PRRS的活性疫苗的方法，其特征在于：该方法主要包括将权利要求1的病毒株在权利要求9的细胞克隆中繁殖。

13.权利要求12的方法，其特征在于：该方法将病毒株在34℃进行繁殖。

14.权利要求12或13的方法，其特征在于：所获得的减毒株的制剂为水性分散液、油性乳液、脂质体组合物或冻干形式，带有或不带有权利要求6中的佐剂。

15.权利要求12-14中任一权项的方法，其特征在于：所得减毒株被热灭活或化学灭活，直到它被完全灭活。

16.一种PRRS诊断方法，其特征在于：该方法包括权利要求1的减毒株和/或至少一种来源于它的病毒性抗原。

17.一种检测PRRS抗体的方法，该方法包括下列步骤：a)使权利要求1的减毒病毒株适宜在培养微板中的稳定细胞培养物中生长，其方式为每孔用大约20-40个感染性颗粒感染；b)用已知的固定剂把感染的细胞固定在固相上；c)通过在微板中培养猪血清，用IPMA技术对其染色，来检测来自猪血清的抗体；

18.权利要求17的方法，其中稳定的细胞培养物是权利要求9的细胞克隆。

19.权利要求1中的减毒病毒株在制备抗被称作PRRS的猪病的疫苗中的应用。

20.权利要求1中的减毒病毒株在制备检测被称作PRRS的猪病的诊断试剂盒中的应用。