[发明专利]TNF－α转变酶

权利要求书

1．一种分离和纯化的TACE多肽。

2．根据权利要求1所述的分离和纯化的多肽，其分子量约为80kD。

3．根据权利要求1所述的分离和纯化的多肽，其是非糖基化形式。

4．根据权利要求1所述的分离和纯化的多肽，其选自包括SEQ ID NO:2的氨基酸18-Xaa的多肽，其中Xaa是选自氨基酸671至824的一个氨基酸。

5．分离和纯化的与权利要求1所述的多肽结合的抗体。

6．根据权利要求5所述的分离和纯化的抗体，其中抗体是单克隆抗体。

7．一种检测分子的TACE抑制活性的方法，包括使所述分子与一种底物混合，使混合物和权利要求1所述的多肽培育，和用色谱分析检测底物裂解的程度。

8．根据权利要求7所述的检测分子的TACE抑制活性的方法，其中底物包括氨基酸序列Leu-Ala-Gln-Ala-Val-Arg-Ser-Ser。

9．一种用权利要求1所述的多肽根据结构设计所述多肽的抑制剂的方法，包括步骤决定这种多肽的三维空间结构，分析三维空间结构可能结合底物位点，合成一个可加入可预计活性位点的分子，和测定分子的TACE抑制活性。

10．一种检测分子TNF-裂解活性的方法，包括使所述分子与包括氨基酸序列Leu-Ala-Gin-Ala-Val-Arg-Ser-Ser的底物培育，和检测底物裂解的程度。

11．一种分离的核酸，其选自：

(a)天然哺乳动物TACE基因的编码区域；

(b)包括SEQ ID NO:1的52-2472的核酸的cDNA；

(c)与(a)或(b)的核酸至少有80％相同并编码将TNF-α从26kD形式转变为17kD形式的多肽的核酸；和

(d)可退化成有如(a),(b)或(c)确定的核酸的基因密码并可编码有生物活性的TACE的核酸。

12．根据权利要求11所述的分离的核酸，其中TACE是人ACE。

13．根据权利要求11所述的分离的核酸，其编码包括SEQ ID NO:2的18-671个氨基酸的多肽。

14．一种定向表达权利要求11所述的核酸序列的表达载体。

15．一种用权利要求11所述的表达载体转染或转化的宿主细胞。

16．一种生产TACE多肽的方法，包括在加速表达的条件下培养权利要求15所述的宿主细胞，和从培养基中回收多肽。

17．一种抑制TNF-α从哺乳动物细胞膜上裂解的方法，包括对这种动物给有效量的化合物，化合物可抑制包括SEQ ID NO:2的18-671氨基酸序列的酶的TNF-α蛋白酶解活性。

18．一种抑制TNF-α从细胞膜上裂解的方法，包括用有SEQ ID NO:2的18-671氨基酸的每封闭TNF-α的结合。

19．一种处理有过量生产或未调控生产的TNF-α特征的疾病的哺乳动物的方法，包括对哺乳动物给一种组合物，组合物含有一定量可有效抑制包括SEQ IDNO:2的18-671氨基酸序列的酶的TNF-α蛋白酶解活性的化合物。