[发明专利]产生具有正确的折叠和二硫键键合的IGF-I和IGFBP-3的方法无效
申请号: | 96195432.9 | 申请日: | 1996-05-30 |
公开(公告)号: | CN1214689A | 公开(公告)日: | 1999-04-21 |
发明(设计)人: | A·索莫;Y·奥加瓦;P·陶 | 申请(专利权)人: | 塞尔特里克斯药物公司 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K14/435;C07K14/65;C12N15/12 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 李瑛 |
地址: | 美国加*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 产生 具有 正确 折叠 二硫键 igf igfbp 方法 | ||
1.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物的方法,该方法包括:使所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物变性;使IGF-I和IGFBP-3的混合物还原,由此形成还原的和变性的IGF-I和IGFBP-3的溶液;向所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物加入氧化剂;并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。
2.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物的方法,该方法包括:使IGF-I变性;使所说的IGF-I还原,由此产生还原的和变性的IGF-I;使IGFBP-3变性;使所说的IGFBP-3还原,由此产生还原的和变性的IGFBP-3;混合所说的还原的和变性的IGF-I与还原的和变性的IGFBP-3,从而形成还原的和变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物;在还原的和变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂;并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。
3.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物的方法,该方法包括:使IGF-I变性,由此产生变性的IGF-I;使IGFBP-3变性,由此产生变性的IGFBP-3;混合所说的变性的IGF-I与变性的IGFBP-3,从而形成变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物;使所说的变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物还原,从而形成变性的和还原的IGF-I和IGFBP-3的混合物;在变性的和还原的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂;并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。
4.权利要求1的方法,该方法还包括从所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物分离所说的天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。
5.权利要求1的方法,该方法还包括从所说的天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物分离天然的IGF-I。
6.权利要求1的方法,该方法还包括从所说的天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物分离天然的IGFBP-3。
7.权利要求1的方法,该方法还包括在添加所说的氧化剂之前稀释所说的变性的和还原的IGF-I和IGFBP-3的混合物的步骤。
8.权利要求1的方法,其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物的摩尔比率大约为1比3到3比1。
9.权利要求1的方法,其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物的摩尔比率大约为1.5比1到1比1.5。
10.权利要求1的方法,其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由尿素或胍变性,所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由二硫苏糖醇、2-巯基乙醇、二硫赤藓糖醇、半胱氨酸、半胱胺,或还原的谷胱甘肽还原,所说的氧化剂是胱氨酸、胱胺、氧气、氧化的二硫苏糖醇、氧化的二硫赤藓糖醇,或氧化的谷胱甘肽。
11.权利要求1的方法,其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由尿素(浓度大约在1到2M)变性,所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由二硫苏糖醇(浓度大约在5至15mM)还原,所说的氧化剂浓度大约在5至15mM。
12.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物方法,该方法包括:使IGF-I变性;使所说的IGF-I还原;加入天然IGFBP-3,由此形成IGFBP-3与还原的和变性的IGF-I的溶液;在所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂;并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。
13.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物方法,该方法包括:使IGFBP-3变性;使所说的IGFBP-3还原;加入天然的IGF-I,由此形成IGF-I与还原的和变性的IGFBP-3的溶液;在所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂;并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。
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