[发明专利]产生具有正确的折叠和二硫键键合的IGF－I和IGFBP－3的方法

权利要求书

1.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物的方法，该方法包括：使所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物变性；使IGF-I和IGFBP-3的混合物还原，由此形成还原的和变性的IGF-I和IGFBP-3的溶液；向所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物加入氧化剂；并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。

2.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物的方法，该方法包括：使IGF-I变性；使所说的IGF-I还原，由此产生还原的和变性的IGF-I；使IGFBP-3变性；使所说的IGFBP-3还原，由此产生还原的和变性的IGFBP-3；混合所说的还原的和变性的IGF-I与还原的和变性的IGFBP-3，从而形成还原的和变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物；在还原的和变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂；并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。

3.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物的方法，该方法包括：使IGF-I变性，由此产生变性的IGF-I；使IGFBP-3变性，由此产生变性的IGFBP-3；混合所说的变性的IGF-I与变性的IGFBP-3，从而形成变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物；使所说的变性的IGF-I和IGFBP-3的混合物还原，从而形成变性的和还原的IGF-I和IGFBP-3的混合物；在变性的和还原的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂；并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。

4.权利要求1的方法，该方法还包括从所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物分离所说的天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。

5.权利要求1的方法，该方法还包括从所说的天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物分离天然的IGF-I。

6.权利要求1的方法，该方法还包括从所说的天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物分离天然的IGFBP-3。

7.权利要求1的方法，该方法还包括在添加所说的氧化剂之前稀释所说的变性的和还原的IGF-I和IGFBP-3的混合物的步骤。

8.权利要求1的方法，其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物的摩尔比率大约为1比3到3比1。

9.权利要求1的方法，其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物的摩尔比率大约为1.5比1到1比1.5。

10.权利要求1的方法，其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由尿素或胍变性，所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由二硫苏糖醇、2-巯基乙醇、二硫赤藓糖醇、半胱氨酸、半胱胺，或还原的谷胱甘肽还原，所说的氧化剂是胱氨酸、胱胺、氧气、氧化的二硫苏糖醇、氧化的二硫赤藓糖醇，或氧化的谷胱甘肽。

11.权利要求1的方法，其中所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由尿素(浓度大约在1到2M)变性，所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物由二硫苏糖醇(浓度大约在5至15mM)还原，所说的氧化剂浓度大约在5至15mM。

12.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物方法，该方法包括：使IGF-I变性；使所说的IGF-I还原；加入天然IGFBP-3，由此形成IGFBP-3与还原的和变性的IGF-I的溶液；在所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂；并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。

13.一种用于产生天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物方法，该方法包括：使IGFBP-3变性；使所说的IGFBP-3还原；加入天然的IGF-I，由此形成IGF-I与还原的和变性的IGFBP-3的溶液；在所说的IGF-I和IGFBP-3的混合物中加入氧化剂；并且形成天然的IGF-I和IGFBP-3的复合物。