[发明专利]来自产黄青霉的苯乙酰基CoA连接酶

权利要求书

1.一种可从产黄青霉中得到、具有PAA-CoA连接酶活性的酶，是通过培养、收集并超声处理菌丝体，除去细胞碎片并通过阴离子交换色谱、疏水相互作用色谱、用底物洗脱的亲和色谱和凝胶过滤色谱分离超声处理物而得到的，其中用PAA和辅酶A依赖性试验检测有活性的色谱馏份。

2.根据权利要求1的酶，其通过SDS-PAGE确定的表观分子量为约63 kDa。

3.根据权利要求1或2的酶，包括下列N末端氨基酸序列：

V-F-L-P-P-K-E-S-G-Q-L-D-P

4.根据前述任一权利要求的酶，主要含有图1/ID SEQ 1所示的氨基酸序列。

5.编码权利要求1-4任一酶的DNA。

6.根据权利要求5的DNA，具有图2或4所示的限制位点构型。

7.根据权利要求6的DNA，主要含有图3/ID SEQ 2的DNA序列。

8.在高严紧度条件下与权利要求5、6或7的DNA或其片段杂交的DNA。

9.含有权利要求5-8任一DNA的载体，所述载体用于在适宜的宿主生物中表达具有PAA-CoA连接酶活性的酶。

10.含有权利要求5-8任一DNA的转化宿主。

11.权利要求9的转化宿主用于生产青霉素或提高青霉素产生生物的效价的用途。

12.制备具有PAA-CoA连接酶活性的酶的方法，包括培养青霉属菌株，然后提取并纯化，其中用PAA和辅酶依赖性试验检测有活性的馏份。