[发明专利]用于癌症治疗的分子嵌合体的制备方法及应用

权利要求书

1一种制备用于前药治疗的分子嵌合体的方法，该方法包括：使一个能够在哺乳动物癌细胞中被选择性激活的转录调控DNA顺序与一个编码一种杂合酶的DNA顺序连接，所述酶能够催化前药转化为对癌细胞有毒的药剂。

2.如权利要求1所述的方法，其中转录调控DNA顺序是组织特异性或癌特异性转录调控DNA顺序。

3.如权利要求2所述的方法，其中转录调控DNA顺序是癌特异性转录调控DNA顺序。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中转录调控DNA顺序包含一个启动子。

5.如权利要求4所述的方法，其中转录调控DNA顺序还包含一个增强子。

6.如前述权利要求1所述的方法，其中转录调控DNA顺序得自一种或多种下列基因：清蛋白、甲胎蛋白、癌胚抗原、酪氨酸羟化酶、胆碱乙酰转移酶、神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白、胰岛素、γ-谷氨酰基转肽酶、多巴脱羧酶、HER2/neu和N-myc。

7.如权利要求6所述的方法，其中转录调控DNA顺序得自癌胚抗原、HER2/neu或甲胎蛋白的基因。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述嵌合体还含有位于编码杂合酶的DNA顺序下游的多聚腺苷酸化信号。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述杂合酶选自水痘带状疱疹病毒胸苷激酶、羧肽酶G2、碱性磷酸酶、青霉素V酰胺酶及胞嘧啶脱氨酶。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述杂合酶是胞嘧啶脱氨酶。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述癌细胞是表达甲胎蛋白的畸胎癌或胃肠道肿瘤细胞，或睾丸非精原细胞癌细胞或肝癌细胞。

12.一种制备含有分子嵌合体的还原病毒载体的方法，该方法包括连接含有以下顺序的DNA顺序：一个5′病毒长末端重复顺序、一个顺式作用的泼西包衣壳顺序、用权利要求1-11中任一项的方法制备的分子嵌合体、一个3′病毒长末端重复顺序。

13.一种制备感染性病毒粒子的方法，该方法包括将用权利要求12的方法制备的还原病毒载体包入病毒粒子中。

14.如权利要求13所述的方法，其中感染性病毒粒子是由包装细胞系产生的。

15.一种制备按权利要求12或13制备且能够选择性感染靶组织的感染性病毒粒子的方法，该方法包括对病毒粒子的env蛋白进行修饰以促进细胞特异性病毒吸收。

16.一种制备药物制剂的方法，该方法包括使按权利要求13至15中任一项制备的感染性病毒粒子与可药用的载体混合。

17.一种病毒载体在制备用于癌症前药治疗的药物中的应用，所述载体含有一种嵌合体，所述嵌合体包含一个能够在哺乳动物癌细胞中被选择性激活的转录调控DNA顺序，以及一个与该转录调控DNA顺序有效连接并编码一种杂合酶的DNA顺序，所述酶能够催化前药转化为对癌细胞有毒的药剂。

18.如权利要求17所述的应用，其中所述载体是还原病毒载体。

19.如权利要求18所述的应用，其中所述载体是一种自我失活(SIN)载体。

20.一种感染性病毒粒子在制备用于癌症前药治疗的药物中的应用，所述感染性病毒粒子是由一种包装细胞系产生的，所述细胞系含有如权利要求17-19中任一项所限定的病毒载体。

21.如权利要求20所述的应用，其中所述病毒粒子是一种还原病毒。

22.如权利要求20或21所述的应用，其中所述病毒粒子已被改造而能选择性地感染癌细胞。

23.如权利要求22所述的应用，其中所述经过改造的病毒粒子含有经过修饰的被膜糖蛋白。

24.如权利要求23所述的应用，其中所述经过修饰的被膜糖蛋白是含有大SHBV被膜蛋白的肝细胞结合位点的修饰env基因产物。

25.一种前药在制备用于癌症治疗的药物中的应用，所述治疗是用如权利要求17-24中任一项所述的分子嵌合体、病毒载体或感染性病毒粒子进行的。