[发明专利]用于癌症治疗的分子嵌合体的制备方法及应用

说明书

本申请是于1990年8月29日提交的、申请号为90107343.1、发明名称为“用于癌症治疗的分子嵌合体的制备方法及应用”的专利申请的分案申请。

本发明涉及分子嵌合体；感染性病毒粒子；其构建方法；含有它们的约物制剂；它们在治疗上的应用，特别是在病毒指导的酶前药治疗(具体说是癌症的治疗，更具体地说是肝细胞癌的治疗)上的应用；以及可被杂合酶催化成细胞毒性或细胞抑制性代谢物的药剂(如嘌呤阿拉伯糖苷和取代的嘧啶)在病毒指导的酶前药治疗上的应用。

所有的癌症是全世界的主要病因之一。癌症化疗领域的研究已经得到了多种具有不同程度疗效的抗肿瘤药剂。临床上应用的标准药剂包括亚德里亚霉素、放线菌素D、氨甲蝶呤、5-氟尿嘧啶、顺氯氨铂、长春新碱和长春花碱。但是，已知这些现有的抗肿瘤药剂有各种缺点，例如对健康细胞有毒、某此类型的肿瘤产生抗性。其它形式的疗法如外科手术也是已知的。但本领域专业人员认识到需要治疗肿瘤的新方法和新实体。

肝细胞癌(HCC)是当今世界主要的恶性疾病之一，其中发病率最高的是日本、中国、亚洲的其它地区和非洲的亚撒哈拉地区。最近的证据表明，欧洲和北美的肝细胞瘤发病率在上升。估计这种疾病每年造成高达大约1,250,000人的死亡，或者这一死亡人数与该疾病有关，因而从数字上看这是世界上主要的恶性疾病之一。

肝细胞癌的预后总是很差，遍布世界的发病率几乎与死亡率相等。诊断后的平均生存时间低于四个月。只偶尔见到长期生存(定义为诊断后生存一年以上)。大多数肝细胞癌患者或者死于伴随或不伴随大量出血的肝衰竭并发症，或者死于巨大的肿瘤负荷的一般作用，这些作用伴有恶病质、营养不良、感染和脓毒症。虽然会发生远距离转移(高达90％的患者在死亡时有转移肿瘤)，但最经常限制生存的仍是区域性疾病。因此，虽然人们会认识到转移性疾病的治疗也具有重要意义，但旨在控制肝肿瘤的治疗才是适当的(Kew M.C.Postgraduate MedicalJoumal59(Suppl.)78-87，1983；Berk.P.(Ed)Seminars in Liver Disease4(2)，Thieme-Stratton Inc.N.Y.N.Y.，1984)。

临床医师现有的疗法从整体上说并不是这种疾病的有效疗法(Nerenstone等，Cancer Treatment Reviews 15：1-31，1988)。迄今为止，外科手术一直是唯一的有效疗法。但在作出诊断时，绝大多数患者不能子受彻底的外科手术。在某些研究(Nerenstone等，同上)中发现，能够承受外科手术的患者不足3％，并且在这个很小的百分比中，有大约50％出现术后病变(Nerenstone等，同上)。

体内单一或配伍药剂化疗法和放射疗法基本无效，这更增加了对治疗这种疾病的新途径和新疗法的需求。

基因疗法涉及把某些新基因稳定地整合到特定的靶细胞中，并在整合后表达这些基因，从而改变该特定靶细胞的表型(综述见Anderson，W.F.Science 226：401-409，1984；Mc Cormick，D.Biotechnology 3；690-693，1985)。基因疗法对涉及一个缺陷酶或缺失酶的置换的遗传病的治疗可能是有益的，所述的酶有Lesch Nyhan病中的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶；严重免疫缺陷疾病中的嘌呤核苷磷酸化酶；严重综合免疫缺陷病中的腺苷脱氨酶。但基因疗法仍未应用于临床，虽然某些类型的基因疗法可能很快就要应用于某些疾病。

本发明人发现，有可能用能够选择性地转化为细胞毒性或细胞抑制性代谢物的化学药剂，选择性地抑制哺乳动物癌细胞的生长或将其杀死。达到这一目的方法是：构建一种分子嵌合体，它包含一个“靶组织特异性”转录调控顺序(TRS)，该顺序在靶组织如癌细胞中被选择性激活，这便控制了一种杂合酶的表达。此分子嵌合体可通过合适的载体进行操作并掺入感染性病毒粒子中。给患者施用含有分子嵌合体的感染性病毒粒子后，即在靶细胞内选择性地表达出酶。这样便可就地达到施用这样一些化合物的目的，这些化合物能被上述酶选择性代谢成某些代谢物，而这些代谢物要么被进一步代谢成细胞毒性或细胞抑制性药剂，要么实际上就是细胞毒性或细胞抑制性药剂。

本发明是普遍适用的，并将就肝细胞癌来说明。