[发明专利]受环境溶氧浓度调控的大肠杆菌外源基因表达系统无效
| 申请号： | 97106485.7 | 申请日： | 1997-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN1203276A | 公开（公告）日： | 1998-12-30 |
| 发明（设计）人： | 龚毅;童芹;杨胜利 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生物工程研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70 |
| 代理公司： | 上海华东专利事务所 | 代理人： | 衷诚宣 |
| 地址： | 20023*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 环境 浓度 调控 大肠杆菌 基因 表达 系统 | ||
【权利要求书】：
1.一种可用于各种外源基因表达的大肠杆菌表达系统，其特征是含有一个能表达T7RNA聚合酶的低拷贝质粒和另一个由T7启动子控制表达外源基因的高拷贝质粒。
2.如权利要求1所述的大肠杆菌表达系统，其特征是低拷贝质粒中的T7RNA聚合酶基因被置于透明颤菌血红蛋白基因(Vgb)的启动子控制之下。
3.如权利要求1所述的大肠杆菌表达系统，其特征是先构建一个受Vgb的启动子调控，能表达T7RNA聚合酶基因的质粒pKK-T，用工具酶处理质粒pKK-T，可获得一个长度为2.9Kb的DNA片段，该片段包含有在Vgb基因的启动子控制下的T7RNA聚合酶基因，将其插入低拷贝质粒pWSK129中得到质粒pTQ107。转化大肠杆菌菌株BL21，得到基因工程菌GJ100。
4.如权利要求3所述的质粒pKK-T，其特征是质粒pKK-T经过下列过程得到：[1]用聚合酶链反应扩增技术获得带有特定粘端的T7RNA聚合酶基因。[2]将T7RNA聚合酶基因插入Vgb基因的启动子下游，得到质粒pKK-T。
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