[发明专利]骨生长刺激素注射剂及其制备方法

说明书

本发明属于医用配置品技术领域，涉及一种从天然动物骨材料中提取的骨生长因子注射剂及其制备方法。

在骨科医学界，骨诱导理论在骨修复中的作用，越来越受到重视。用骨生长因子治疗骨折、骨缺损、骨不连等骨科疾病是国内外竟相开展的研究课题。大量的研究报告已经证实，骨形态发生蛋白BONE MORPHOGE PROTNETIN(以下简称BMP)可诱导血管周围游动间充质细胞转化为不可逆性的骨系细胞，从而可在骨骼或骨骼以外部位产生软骨或骨组织，这一机理已被国内外骨科医学界所公认。在本发明以前的国内外现有技术中，以BMP为基础的各项诱导成骨的研究工作开展的很多，例如：对BMP免疫原理与调节功能的研究；BMP与其它因子复合应用的研究；基因重组BMP的研究；载体对BMP活性影响的研究等等。已有实验证明，天然提取部分纯化的BMP有很好骨诱导活性，含有几种分子量的BMP，较纯化单一分子量的骨诱导活性高，但成本高、生产费时，不能满足需要。载体与BMP活性的关系是BMP的实验研究和临床应用中不可回避的问题，因为BMP在骨中的含量很少，提取量有限，使用高纯化的BMP又易被组织吸收，难以发挥作用。因此，BMP的应用必须同时考虑采用何种最佳载体的问题。现有技术中常用的载体有脱钙骨基质(DBM)、多孔磷酸钙(TCP)、羟基磷灰石(HA)、生物活性玻璃陶瓷及纤维蛋白等，但是这些载体都或多或少地存在这样那样的问题。综上所述，虽然近年来以BMP为基础的骨诱导成骨的研究已形成高潮，有些工作也很有创新，但至今为止，属于很成熟的、能够用于临床的BMP医用配置品并不多见。与上述骨诱导机理不同的另一类现有技术中，中国CN89105016.7号专利公开了一种”细胞生长刺激素及其制造方法”，该药物中的主要成分为细菌血浆凝固酶，并含有蛋白质、多肽和多种氨基酸，是猪心肌蛋白冻和氯化钠水溶液作培养基的黄色金葡萄球菌代谢产物的提取液。这种促使骨折愈合及治疗溃疡的注射针剂，在治病机理上强调的是多种生物活性物质的协同作用，不需要考虑有效成分或有效部位作用机理和分离问题，因此，该药物在实际使用中的用量也非常大，需要进行多次注射才显效果。目前，该药物己面市好几年，但至今对药用机理和实际疗效没有明确的说法。与上述骨诱导理论指导下的骨生长因子治疗机理有着层次上的区别。

针对上述现有技术状况，本发明的目的在于：提供一种具有以天然提取、部分纯化的BMP为基础的复合型骨生长因子和具有缓释作用的最佳致敏载体的注射剂型医用配置品及制备方法，并且力求使其效果显著、需用量少、易于保存、使用方便。

现将本发明构思及技术解决方案叙述如下：

以BMP为基础的诱导成骨理论认为：诱导成骨必须具备三个条件，即：(1)诱导刺激物(如骨生长因子)；(2)间充质类细胞；(3)利于骨生长的血液供应环境。本发明在大量实验的基础上，对骨形态发生蛋白BMP与碱性成纤维细胞生长因子BASIC FIBROBLAST GROWTH FACTOR(以下简称bFGF)的联合局部应用，作了深入的研究。实验结果证实，除了骨形态发生蛋白BMP可诱导血管周围游动的间充质细胞转化为不可逆性的的骨系细胞，骨骼或骨骼以外部位产生软骨和骨组织外，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)有刺激骨细胞增殖作用，是一种强大的毛细血管增殖刺激剂，而软骨内成骨和毛细血管的形成是骨诱导成骨的重要步骤。实验还证明，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对蛋白质高分子物质具有良好的吸附作用，对BMP和bFGF的致敏作用十分明显，而且与二者的相溶性很好，可组成完全的混悬液，是一种有效的缓释载体。据此，本发明首先提供了一种骨生长刺激素医用配制品，其特征在于：含有一种以上外源性骨生长因子和载体；外源性骨生长因子为牛骨形成发生蛋白(bBMP)或重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)或基因重组人成纤维细胞生长因子(rhFGF)；致敏载体为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；外源性骨生长因子牛骨形态发生蛋白(bBMP)或基因重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)与致敏载体聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、碱性纤维细胞生长因子(bFGF)或基因重组人成纤维细胞生长因子(rhFGF)的配比为30mg∶100mg∶8000IU(IU为国际单位1IU相当于1～2ng)。

本发明还提供了骨生长刺激素注射剂的制备方法，其特征在于，该配置品的制备过程为：

(1)、称取BMP1.5克，粉碎，用20ml 4M的尿素溶解，放置4℃冰箱，12小时后，用匀浆器匀浆；