[发明专利]新颖的雌激素受体无效
申请号: | 97111606.7 | 申请日: | 1997-03-25 |
公开(公告)号: | CN1169472A | 公开(公告)日: | 1998-01-07 |
发明(设计)人: | S·默斯勒曼;R·笛吉克马 | 申请(专利权)人: | 阿克佐诺贝尔公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/62;C12N15/85;C12N1/21;C12N5/16;C12Q1/00;C12Q1/68;C07K14/72 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 李瑛 |
地址: | 荷兰*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新颖 雌激素 受体 | ||
1、一种分离的DNA,该DNA编码具有N-末端功能区、DNA结合功能区和配体结合功能区的蛋白,其中所述蛋白的所述DNA结合功能区的氨基酸序列显示与示于SEQ ID NO:3中的氨基酸序列至少80%同源性,且所述蛋白的所述配体结合功能区的氨基酸序列显示与示于SEQ ID NO:4中的氨基酸序列至少70%同源性。
2、根据权利要求1的分离的DNA,其特征在于,所述蛋白的所述DNA结合功能区的氨基酸序列显示与示于SEQ ID NO:3中的氨基酸序列至少90%,优选95%,更优选98%,最优选100%同源性。
3、根据权利要求1或2的分离的DNA,其特征在于,所述蛋白的所述配体结合功能区的氨基酸序列显示与示于SEQ ID NO:4中的氨基酸序列至少75%,优选80%,更优选90%,最优选100%同源性。
4、根据权利要求1至3的分离的DNA,所述的DNA编码包含SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:21或SEQ ID NO:25的氨基酸序列的蛋白。
5、根据权利要求1至4的分离的DNA,其特征在于,所述的DNA包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:20或SEQ ID NO:24的核酸序列。
6、一种重组表达载体,它包含根据权利要求1至5之任一的DNA。
7、一种用根据权利要求1至5的DNA或根据权利要求6的表达载体转染的细胞。
8、一种根据权利要求7的细胞,它是一种稳定转染的细胞系,该细胞系表达根据权利要求9至11之任一的甾类受体蛋白。
9、一种蛋白,该蛋白是由根据权利要求1至5的DNA或根据权利要求6的表达载体编码的。
10、根据权利要求9的蛋白,所述的蛋白包含SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:21或SEQ ID NO:25的氨基酸序列。
11、具有N-末端功能区、DNA结合功能区和配体结合功能区的嵌合蛋白,其特征在于,所述嵌合蛋白的所述功能区之至少一个来源于根据权利要求9或10的蛋白,且所述嵌合蛋白的其它功能区之至少一个来源于来自核受体总科的另一受体蛋白,其前提是,所述嵌合蛋白的DNA结合功能区和配体结合功能区来源于不同的蛋白。
12、编码根据权利要求11蛋白的DNA。
13、根据权利要求1至5或12的DNA、根据权利要求6的表达载体、根据权利要求7或8的细胞或根据权利要求9至11的蛋白在鉴定新药物的筛选测定中的用途。
14、一种鉴定根据权利要求9至11蛋白的功能配体的方法,所述的方法包括如下步骤:a)向稳定的宿主细胞引入1)根据权利要求1至5或12的DNA,和2)将适合的报道基因功能性地连接于可操作激素效应元件,所述的HRE能够被所述DNA编码的蛋白之DNA结合功能区所活化;b)将来自步骤a)的宿主细胞与潜在的配体接触,所述的配体将可能结合至由来自步骤a)的所述DNA编码的蛋白的配体结合功能区;c)监控由来自步骤a)的所述报道基因编码的蛋白的表达。
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