[发明专利]分泌型Kex衍生物的制造方法无效
| 申请号： | 97111679.2 | 申请日： | 1997-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN1168922A | 公开（公告）日： | 1997-12-31 |
| 发明（设计）人： | 孙田浩二;增田丰文;铃木雄司;薮田雅之 | 申请（专利权）人： | 三得利公司 |
| 主分类号： | C12N9/50 | 分类号： | C12N9/50;C12N15/57;C12N1/21;C12P21/06;//;C12R184;178;172) |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人： | 段承恩 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分泌 kex 衍生物 制造 方法 | ||
1、具有Kex2蛋白酶的酶活性的蛋白质，其特征在于，它是以含有DNA的表达载体使甲醇利用性酵母进行转化，培养所得到的转化体，从该培养物中提取而得到的，上述DNA编码以序列号1的氨基酸序号1的Met作为N末端、以氨基酸序号618-698之间的任一氨基酸作为C末端的天然氨基酸序列或者对该天然氨基酸序列通过一个或数个氨基酸的取代、缺失或者插入而进行修饰的氨基酸序列。
2、权利要求1所述的蛋白质，其中，上述天然氨基酸序列的C末端的氨基酸是在序列号1中的氨基酸序号630-688中的任一氨基酸。
3、权利要求1所述的蛋白质，其中，上述天然氨基酸序列的C末端的氨基酸是在序列号1中的氨基酸序号630-682中的任一氨基酸。
4、权利要求1所述的蛋白质，其中，上述的天然氨基酸序列的C末端的氨基酸是在序列号1中的氨基酸序号630-679中的任一氨基酸。
5、编码权利要求1-4中任一项所述的蛋白质的DNA。
6、含有权利要求5所述的DNA而构成的表达载体。
7、用权利要求6所述的表达载体使甲醇利用性酵母进行转化而得到的转化体。
8、权利要求7所述的转化体，其中，上述的甲醇利用性酵母是毕赤氏酵母属(Pichia)、汉逊氏酵母属(Hansennula)或假丝酵母属(Candida)的酵母。
9、权利要求8所述的转化体，其中，上述甲醇利用性酵母是巴斯德毕赤氏酵母(Pichia Pastoris)、多形汉逊氏酵母(Hansennula Polymorpha)或者博伊丁氏假丝酵母(Candidaboidinii)。
10、权利要求1-4中任一项所述的蛋白质的制造方法，其特征在于，培养权利要求7-9中任一项所述的转化体，从该培养物中提取该肽。
11、权利要求10所述的方法，其特征在于，用阴离子交换色谱法或疏水性色谱法从培养上清液中提取上述多肽。
12、从嵌合蛋白质中切出目的肽的方法，其特征在于，使权利要求1-4中任一项所述的蛋白质对邻接于目的肽的N末端的Arg-Arg、Lys-Arg或Pro-Arg序列及含有目的肽的嵌合蛋白质作用，而得到目的肽。
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