[发明专利]人降钙素基因相关肽脂质体组合物及其制法

说明书

本发明涉及一种人降钙素基因相关肽脂质体组合物及其制备方法，特别是采用磷脂类与所述的人降钙素基因相关肽结合的方法获得的产品。

人降钙素基因相关肽(hCGRP)是人体内的神经调节递质，是已知的最强的血管扩张物质，它已经成为市售的产品。但是它在人体内的半衰期仅为9-12分钟，所以与其它多肽物质一样，这种物质在水溶液及体内很不稳定，临床使用受限制。

为了使hCGRP成为适合临床应用的药物，本发明的目的在于提供一种人降钙素基因相关肽脂质体组合物及其制备方法，特别是采用磷脂类与所述的人降钙素基因相关肽结合的方法获得稳定、有效的产品。采用本发明方法制得的人降钙素基因相关肽脂质体组合物产品，能够使得人降钙素基因相关肽的逐渐释放，达到长效作用，其半衰期可达72分钟。对心血管疾病有防治作用。

为了完成本发明之目的，本发明特别涉及一种人降钙素基因相关肽药物组合物，其特征在于该组合物含有天然大豆磷脂脂质体，其中该组合物中的人降钙素基因相关肽与所述的天然豆磷脂脂质体的重量比为1-2∶100-8000，优选为1.5-2∶2500-6000。

所述的人降钙素基因相关肽药物组合物中优选：每5ml该组合物中含有20-2000pg的人降钙素基因相关肽。

人降钙素基因相关肽药物组合物可包括药物学上可接受的赋形剂和溶媒添加剂，例如甘露糖醇、注射用水、生理盐水和葡萄糖溶液。

本发明还涉及人降钙素基因相关肽药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

1)向所述的经纯化干燥的大豆磷脂中按磷脂：水＞1∶1000的重量比加入水，超声振荡得到小单层膜的大豆磷脂脂质体；

2)将人降钙素基因相关肽的水溶液与所述的大豆磷脂脂质体混合，使人降钙素基因相关肽与大豆磷脂脂质体的混合重量比为1-2∶100-8000，优选1.5-2∶2500-6000，在超声振荡与37℃下保温30-60分钟，得到稳定的人降钙素基因相关肽药物组合物，其中，所述人降钙素基因相关肽水溶液中人降钙素基因相关肽与水的重量比为1∶1000-25000。

上述的人降钙素基因相关肽药物组合物可进一步冻干溶解到水溶液中，使每5ml水溶液中含有20-2000pg的人降钙素基因相关肽。

本发明进一步涉及上述的人降钙素基因相关肽药物组合物对高血压和充血性心力衰竭的治疗方法。所述的方法包括静脉或经口腔、鼻腔、直肠粘膜给药，其中，静脉滴注的有效使用剂量相当于hCGRP含量为0.1-10pg hCGRP/kg体重，生物利用度为约80％。

以下对本发明进行详细说明。制备人降钙素基因相关肽脂质体稳定组合物的依据

hCGRP氨基酸组成具有两个显著特点：(1)37个氨基酸中极性氨基酸8个，疏水氨基酸16个，间隔分布，极性氨基酸之间分布6-8个非极性氨基酸。(2)8个极性氨基酸中碱性氨基酸4个，酸性氨基酸1个，在水溶液中呈碱性带有正电荷，其等电点pI＝10。每分子hCGRP含有2个精氨酸残基(Arg)、2个赖氨酸残基(Lys)和一个门冬氨酸(Asp)残基。在生理pH范围内，Lys和Arg带正电荷，而Asp带负电荷，正电荷总数与负电荷总数比例(∑Lys+∑Arg)/(∑Glu+∑Asp)代表着分子的酸碱性，比例大于1为碱性；否为酸性。hCGRP的电荷比值为4，是一种强碱性多肽分子，在水溶液中带有三个净剩的正电荷。这说明hCGRP是一种含有大量疏水氨基酸残基的强碱性的两性分子。

分析磷脂结构，特别是大豆磷脂的组成特征，发明人发现大豆磷脂为天然磷脂，其组成和结构具有如下特点，(1)酸性磷脂，含量超过40％，在水溶液中呈酸性、头部基团带有负电荷；(2)不饱和脂肪酸含量超过70％，具有抗氧化、抗水解的保护能力；(3)当大豆磷脂和H₂O比例(w/w)大于1∶1000时，形成的单层膜小脂质体(20-50nm)具有最大的热力学稳定性。