[发明专利]用于基因治疗的阳离子类脂

说明书

本发明涉及胍的阳离子类脂衍生物，它们的制备及用途，以及利用这些衍生物制备的药物组合物。

有一些基于类脂的物质如脂质体已被有效地用作一些药品和生物制品中的载体，用来将生物活性物质如药物、放射治疗剂、酶、病毒、核酸(例如：质粒、DNA和RNA结构、转录因子及其它细胞载体)等引入培养细胞系和动物体内。例如，最近已有几种类脂包囊的药物如道诺霉素(DaunoXome^TM)和两性霉素B(Abelcet^TM,Ambisome^TM,Amphotec^TM)获得了食品和药品管理局(FDA)的批准或被列入了目前FDA审查的NDA项目。

在这种情况下人们作了更多的努力，希望研制出能有用并有效地将遗传物质直接递送到生物细胞的类脂介导的方法。例如，基因治疗技术就是通过以所希望的治疗方式用能影响基因复制、转录和翻译过程的核酸结构转染患者的靶细胞，从而减轻患者的病情。一般这些核酸结构是高分子量的、聚阴离子分子，因此若要在体内、来自体内或在体外有效地转染细胞，则通常需要载体介导的递送。参见，例如美国专利No.5,264,618，它描述了若干在临床应用的利用类脂载体的技术和这样的药物组合物。这种转染方法也可用于研制可生产有商业意义的蛋白质的新的细胞系和动物。

最近已公开了几种用于质粒递送的类脂载体，参见Felgner等人的美国专利4,897,355,4,946,787,5,049,386,5,366,737,5,545,412；美国专利5,264,618,5,283,185(Epand等人，描述的DC-chol)，5,334,761；PCT申请WO 95/14381,WO 96/01840,WO 96/1841,WO96/18372，以及Felgner等人，酶学方法，5,67-75(1993)。尽管在上述参考文献中描述的化合物有助于生物活性物质进入细胞中，但人们仍希望能开发出更多的能提供更高摄取效力、更好的特异性和减少毒性的类脂载体。本发明即满足了这些以及相关的需要。

本发明的一个方面涉及式Ⅰ的胍的阳离子类脂衍生物及其盐、溶剂化物、拆分及未拆分的对映体、非对映体和它们的混合物：

R₁R₂N-C(O)-A-X    式Ⅰ其中：

R₁和R₂可以是相同的或不同的，为C₁₀-C₂₆烃基；

A为亚烃基，其中一个或多个亚甲基可被基团Y任意取代(假如Y基团彼此不能邻接)，而每个Y可独立地为：-O-,-OC(O)-,-C(O)O-,-NR₅-,-NR₅C(O)-,-C(O)NR₅-,NR₅C(O)NR₅-,-NR₅C(O)O-,-OC(O)NR₅-,-S(O)_n-(n为0、1或2)或-NZ-C(=NZ)NZ-,其中每个Z独立地为H或-(CH₂)_mNR₅-C(=NR₅)NR₅，m为1-10的整数，而每个R₅独立地为H或低级烷基；

X是：(1)三烃基铵基，其中烃基彼此相同或不同，或(2)-NH-C(=NR₃)NHR₄，其中R₃和R₄各自独立地为烃基、卤代烷基、羟烷基、O-被护羟烷基、烷氧烷基、卤代烷氧烷基、芳氧烷基、氨基烷基、单或二取代氨基烷基、N-保护的-氨基烷基、酰基、烷氧羰基、芳氧羰基、-C(O)NR₆R₇(其中R₆和R₇独立地为H或烃基)、氮保护基，或R₃和R₄与它们连接的原子一起形成任意取代的单环或双环；但条件是：

当R₁和R₂相同，均为C₁₆烷基，而X为-NH-C(=NH)NH₂时，A不为3丁基链。

X优选为-NH-C(=NR₃)NHR₄。在另一种优选的情况下，R₁和R₂相同，均为单不饱和链烯基。