[发明专利]一种以糖的原酸酯为关键中间体的区选及立体选择性合成寡糖的方法

说明书

本发明属于有生物活性的寡糖的制备技术领域，特别是涉及能用于合成复杂的寡糖、及用于药物的筛选的、以糖的原酸酯为关键中间体的区选及立体选择性合成寡糖的方法。

寡糖，多糖及糖缀合物(糖蛋白，糖脂)是生物体内重要的信息物质，参与所有细胞的接触过程，细胞表面的寡糖在细胞之间的通讯，识别和相互作用，胚胎发生，转移，在信号传递，细胞运动与黏附，以及病原与宿主细胞的相互作用方面起着重要作用。最新的研究表明，寡糖不仅以它们的缀合物在起作用，很多寡糖本身就有重要的生理功能，有的寡糖能激发植物的免疫系统，有的寡糖能诱导根瘤菌的固氮作用：有的寡糖可以与入侵的微生物上的糖蛋白相结合而阻止这些微生物对人体正常细胞的侵袭，而一些寡糖则具有肝素(haparin)的功能，血型决定族寡糖更是很有希望的防治癌症的药物。寡糖在农业，医药业方面有广泛的应用前景。而寡糖和多糖直接做为药物使用，去除疾病，增进健康，将引起防治疾病观念的更新，也是生命科学的一大进展。新兴的“糖工程”(以糖类为基础的药物研制)正处于蓬勃发展的新起点，据“生物工程新闻”(Biotech News)1995，14(4)，7报导，糖类药物的市场份额将从1993年的13％增加至2000年的24％。

对寡糖的合成可采用多种方法，如经典的K-K法见“化学综述”(Chem.Rev.)1993，93，1503.，以及改进的K-K法见“糖的化学和生物化学进展”(Adv.Carbohydr.Chem.Biochem.)1994，50，21.在这些方法中，为保证糖基供体和糖基受体在特定的位置连接，所用的糖基受体一般都只含一个游离羟基，这样在合成复杂的寡糖时，对糖基受体要用不同的保护基保护，步骤繁琐，费时费力。迄今为止尚未见用不保护的糖基受体的报道。

本发明的目的在于采用全新的思路，提供一种步骤简单，省时省力的以糖的原酸酯为关键中间体的区选及立体选择性合成寡糖的方法。

本发明的目的是这样实现的：以最简单的溴代酰基糖为糖基供体，使其与带有二个或二个以上游离羟基的糖基受体反应，在碱性条件及银催化剂作用下，高区域选择性的、高产率的得到糖的原酸酯，然后在TMSOTf的催化作用下重排，得到所需要的双糖或寡糖。糖的原酸酯是本发明的关键中间体，它决定了反应的区域选择性。

本发明的合成方法在于：以溴代酰基单糖或双糖为糖基供体，以带有二个或二个以上羟基的单糖或寡糖为糖基受体，按等摩尔比溶于适量有机溶剂中，加入与糖基供体或糖基受体等摩尔比的有机碱，在室温搅拌下，再加入与糖基供体或糖基受体等摩尔比的催化剂银盐，反应2-8小时后结束。将反应液以有机溶剂稀释后，用水洗溶液，弃去水相，有机相在真空下抽干，得到含游离羟基的糖的原酸酯粗产物，用硅胶柱层析法精制，制备出纯的含游离羟基的糖的原酸酯；或反应液直接在真空下抽干，得含游离羟基的糖的原酸酯粗产物，不经分离，按常规方法乙酰化，所得到的不含游离羟基的糖的原酸酯粗产物用硅胶柱层析法精制，得到纯的不含游离羟基的糖的原酸酯；将含游离羟基的或不含游离羟基的原酸酯溶于适量有机溶剂中，加入催化剂三甲基硅三氟甲磺酸盐(TMSOTf)，其用量与糖的原酸酯摩尔比为0.1-0.8，在室温、搅拌、并在氮气保护下，进行原酸酯的重排，反应2-8小时，按常规方法终止反应，将反应液以有机溶剂稀释后，用水洗溶液，弃去水相，有机相在真空下抽干，所得粗产物用硅胶柱层析法精制，收集相应组分，得到用本发明方法制备出的寡糖化合物。

所述的有机溶剂为卤代烷，醚，酰胺。

所述的卤代烷为二氯甲烷，醚为乙醚，酰胺为二甲基甲酰胺，砜为二甲基亚砜。

所述的有机碱为2，4-二甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，或2，4，6-三甲基吡啶。

所述的银盐为三氟甲磺酸银、高氯酸银、或碳酸银。

所述的糖基供体为为溴代酰基葡萄糖，溴代酰基半乳糖，溴代酰基甘露糖，溴代酰基木糖，溴代酰基阿拉伯糖，溴代酰基来苏糖，溴代酰基麦芽糖，溴代酰基乳糖，溴代酰基纤维双糖。

所述的酰基为乙酰基，苯甲酰基，氯代乙酰基。