[发明专利]检测抗P53抗体的测定方法

权利要求书

1.  一种检测能与p53蛋白结合的抗体的方法，包括：

A)将肽直接固定在生物传感器的传感芯片的流动池上，所述肽能与抗p53抗体特异结合，

B)从待查患者取得血清样品，并将血清样品稀释于适宜的缓冲液中，

C)使稀释的血清样品与固定化肽接触，以及

D)用生物传感器测量抗体与固定化肽的结合。

2.  权利要求1的方法，其中在步骤A中，多种所选择的免疫原性肽每个直接固定在各自分隔的流动池上。

3.  权利要求2的方法，其中第一个肽选自p53蛋白的氨基端区，第二个肽选自p53蛋白的羧基端区。

4.  权利要求1的方法，其中肽选自：

a)一种包含序列1的肽，或一种与之具有基本序列同一性的肽；

b)一种包含序列2的肽，或一种与之具有基本序列同一性的肽；

c)一种包含序列3的肽，或一种与之具有基本序列同一性的肽；以及

d)一种包含序列4的肽，或一种与之具有基本序列同一性的肽。

5.  权利要求3的方法，其中第一种肽包含序列1，第二种肽包含序列4。

6.  权利要求5的方法，更进一步包含第三种含序列2的肽，及第四种含序列3的肽。

7.  权利要求1的方法，其中肽具有磷酸丝氨酸残基。

8.  权利要求1的方法，其中肽具有磷酸苏氨酸残基。

9.  权利要求5的方法，其中第一种肽用巯基偶联固定。

10.  权利要求5的方法，其中第二种肽用氨基偶联固定。

11.  权利要求6的方法，其中第一、三及四种肽用巯基偶联固定，第二种肽用氨基偶联固定。

12.  权利要求1的方法，其中血清样品同时与多种固定肽接触。

13.  权利要求1的方法，其中在将稀释的血清样品与4种固定肽同时接触之前，将血清样品用含有P-20及羧甲基葡聚糖的HEPES缓冲盐溶液稀释1∶2～1∶50。

14.  权利要求2的方法，其中与每种肽结合的抗体量与生物传感器报告的响应单位成正比。

15.  权利要求1的方法，其中固定在流动池上的肽用HCl-SDS溶液除去已结合的抗体而再生，用于分析以后的血清样品。