[发明专利]嵌合异源多亚基粘附素

说明书

                          发明领域

本发明主要涉及嵌合异源多亚基粘附素，它包含异源多亚基受体的胞外结合区，该嵌合异源多亚基粘附素与天然受体的配体结合。本发明还涉及针对异源粘附素的抗体，产生粘附素的方法和使用异源粘附素及其抗体的方法。

                        发明背景

调节细胞生长和分化的信号的传导部分地受各种细胞蛋白的磷酸化作用的调控。蛋白质酪氨酸激酶是催化该过程的酶。据信，受体蛋白质酪氨酸激酶通过对胞内基质的受配体刺激的酪氨酸磷酸化作用来控制细胞的生长。

单一全长受体酪氨酸激酶的ErbB族有4个成员：表皮生长因子受体(EGFR),ErbB2(HER2/neu),ErbB3(HER3)和ErbB4(HER4)。已经鉴定到许多配体(都是不同基因的产物)结合并激活EGFR(Groenen等在1994年对此有所论述)。相反，一个神经调节蛋白基因编码许多蛋白质异构体，其原因在于mRNA转录产物的不同剪接(参见Lemke,G.(1996),mol.Cell.Neurosci.7:247-262)。ErbB3(Carraway,K.L．等，(1994)J.Biol.Chem.269:14303-14306)或ErbB4(Plowman,G.D．等，(1993)Nature 366:473-475)可以作为神经调节蛋白的受体。这些受体和配体在正常的细胞生长和分化中起着重要作用。

生长因子受体蛋白酪氨酸激酶的Ⅰ类亚族包括由erbB1基因编码的170kDa的表皮生长因子受体(EGFR)。erbB1已经被认为与导致人类恶性肿瘤有关。具体地说，已经在侵害性较强的乳房癌、膀胱癌、肺癌和胃癌中观察到该基因表达的增加(Modjtahedi,H．和Dean,C.(1994)Int.J.Oncol.4:277-296)。

Ⅰ类亚族的第二个成员，p185^neu最初被认定是经化学处理过的大鼠的成神经细胞瘤的转化基因的产物。该neu基因(又称erbB2或HER2)编码-185kDa的受体蛋白酪氨酸激酶。人HER2基因的扩增和/或过表达与乳房癌和卵巢癌的预后差有关(Slamon,D.J．等，Science 235:177-182(1987)；和Slamon,D.J．等，Science244:707-712(1989))。已经发现HER2的过表达与其它癌症有关，其中包括胃癌、子宫内膜癌、唾液腺癌、肺癌、肾癌、结肠癌和膀胱癌。所以，Slamon等在美国专利4,968,603中说明了许多检测HER2基因在肿瘤细胞内扩增或表达的诊断试验并要求保护。Slamon等发现，HER2癌基因的多基因拷贝的存在表示疾病更可能由原发肿瘤位置发生扩散，所以需要更积极的治疗，而不是象可能由其它诊断性因素所显示的那样。Slamon等认定，HER2基因扩增测试结合对淋巴结状态的检测极大地改善了预后的效果。

另一相关基因，称erbB3或HER3，已经被人描述过。参见美国专利5,183,884；Kraus等，Proc.Natl.Acad.Sci USA 86:9193-9197(1989)；欧洲专利申请No.444,961 A1；和Kraus等Proc.Natl.Acad.Sci USA 90:2900-2904(1989)。Kraus等发现，人乳房肿瘤细胞系中存在着erbB3水平的显著升高，这意味着erbB3和erbB1及erbB2一样，可能在人恶性肿瘤中起着一定的作用。此外，Kraus等(1993)证明，对嵌合受体EGFR/ErbB3的ErbB3催化功能区的EGF依赖性激活在转染NIH-3T3细胞中引起了增殖应答。而且，这些研究人员证明，某些人乳房肿瘤细胞系表现出明显的稳态ErbB3酪氨酸磷酸化加强，这意味着该受体可能在人恶性肿瘤中起一定的作用。其它研究者已经对erbB3在癌症中的作用进行了研究。已经发现它在乳房癌(Lemoine等，Br.J.Cancer 66:1116-1121(1992))、胃肠癌(Poiler等，J.Pathol.168:275-280(1992)Raykumar等，J.Path ot,170:271-278(1993)和Sanidas等，Int.J.Cancer 54:935-940(19993)和胰腺癌(Lemoine等，J.Cancer 168:269-273和Friess等，Clinical Cancer Research 1:1413-1420(1995)中过量表达。