[发明专利]肿瘤抗原蛋白质,其基因和肿瘤抗原肽

说明书

发明的技术领域

本发明涉及用于活化抗肿瘤免疫的医药、治疗自身免疫性疾患的医药，以及肿瘤或自身免疫性疾病的诊断。更为具体地讲，本发明涉及新型肿瘤抗原蛋白质、其新型基因、新型的肿瘤抗原肽等。先有技术

已知生物体内的免疫系统，特别是T细胞对肿瘤的排除起着重要作用。实际上，在人的肿瘤集中的部位可以观察到对肿瘤细胞有杀伤活性的淋巴细胞浸润(Arch.Surg.,126:200-205,1990)，从黑色素瘤中可以较容易地分离出识别自身肿瘤细胞的细胞毒性T细胞(CTL)(今日免疫，8:385,1987，免疫学杂志，138:989,1987，国际癌症杂志，52:52-59,1992等)。此外，通过引入T细胞来治疗黑色素瘤的临床结果也暗示了T细胞在排除肿瘤中的重要性(国家癌症研究所杂志，86:1159,1994)。

尽管很长一段时间里人们不知道攻击自身肿瘤细胞的CTL的靶分子是什么，但由于最近免疫学和分子生物学的进步，得以逐步阐明其分子机制。即，CTL通过应用T细胞受体(TCR)，识别肿瘤抗原肽与主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类抗原相结合形成的复合体，从而攻击自身的肿瘤细胞。

该肿瘤抗原肽是肿瘤抗原蛋白质在细胞内合成后，由蛋白酶在胞质内分解成肽而形成的。另一方面，在内质网中形成的MHCⅠ类抗原与上述肿瘤抗原肽相结合，通过高尔基体凸面移到高尔基体凹面即成熟面，表达在细胞表面(临床免疫，27(9):1034-1042,1995)。

作为该肿瘤抗原蛋白质，是1991年由T.Boon等首次从人黑色素瘤细胞中鉴定出的命名为MAGE的蛋白质(Science,254:1643-1647,1991)，其后，又从黑色素瘤细胞中鉴定出几种肿瘤抗原蛋白质。

正如T.Boon等在综述(实验医学杂志，183,725-729,1996)中所说述的，到目前为止所鉴定出的肿瘤抗原蛋白质可分为以下四类：

第一类中所包含的肿瘤抗原蛋白质是这样一组蛋白质，在正常组织中，仅在睾丸中表达，在肿瘤组织中，可看到在黑色素瘤，头颈部癌，非小细胞性肺癌、膀胱癌等中表达。作为该类的肿瘤抗原蛋白质，有上述的MAGE，形成12种以上的成员家族的类似蛋白质(实验医学，178:489-495,1993),BAGE(免疫性，2:167-175,1995)和GAGE(实验医学，182:689-698,1995)，每一种蛋白质均从黑色素瘤细胞鉴定出。

虽然该类的肿瘤抗原蛋白质在黑色素瘤中高表达，但在其它肿瘤患者中仅10-30％表达，所以不能广泛用于各种肿瘤的治疗和诊断。

第二类肿瘤抗原蛋白质中包含这样的一组蛋白质，在正常组织中只在黑色素细胞、视网膜中表达，在肿瘤组织中只观察到在黑色素瘤中表达。由于这些组织特异的蛋白质在黑色素瘤这一肿瘤细胞中高表达，所以它们起到对黑色素瘤特异的肿瘤抗原蛋白质的作用。作为这类肿瘤抗原蛋白质，有酪氨酸酶(实验医学杂志，178:489-495,1993)、MART-1(美国国家科学院院刊，91:3515,1994)、gp100(实验医学杂志，179:1005-1009,1994)、gp75(实验医学杂志，181:799-804,1995)，这些基因均从黑色素瘤克隆而来，另外，各别地分离出Melan-A(实验医学杂志，180:35,1994)，与MART-1是同一分子。

但是，因为该类肿瘤抗原蛋白质在黑色素瘤以外的肿瘤中不表达，所以不能广泛用于肿瘤的治疗和诊断。

第三类肿瘤抗原蛋白质是这样一组蛋白质，是通过肿瘤特异性突变而产生的能被CTL新识别的肿瘤抗原肽。作为该类肿瘤抗原蛋白质，有突变的CDK4(Science,269:1281-1284,1995),β-连环蛋白(实验医学杂志，183:1185-1192,1996),MUM-1(美国国家科学院院刊，92:7976-7980,1995)。CDK4、β-连环蛋白中有一个氨基酸发生变异，由此增加了肽的MHC-1类抗原的亲和性，从而被T细胞识别。MUM-1是通过突变，通常不被翻译的内含子部位被翻译后所形成的肽被T细胞所识别。但是由于这些突变的频率很低，不能广泛用于肿瘤的诊断和治疗。

第四类中所包含的肿瘤抗原蛋白质是在正常组织中广泛表达，能被CTL所识别的蛋白质P15(免疫学杂志，154:5944-5955,1995)，它是从黑色素瘤细胞鉴定出的。

到目前为止已知的鉴定肿瘤抗原蛋白质或者肿瘤抗原肽的方法如下。