[发明专利]含不饱和脂肪酸油脂的制造方法

说明书

本发明涉及利用属于被孢霉(Mortierella)属被孢霉(Mortierella)亚属微生物制造含不饱和脂肪酸油脂的方法，该油脂中24,25-甲叉胆甾-5-烯-3β-醇(24,25-Methylenecholest-5-en-3β-ol)含有率少。

人们知道Mortierella属Mortierella亚属微生物可以作为生产花生四烯酸、二高(Dihomo)-γ-亚麻酸、二十碳五烯酸等不饱和脂肪酸的微生物，利用这种微生物已经开发出通过发酵法高效制造花生四烯酸、二高-γ-亚麻酸、二十碳五烯酸的方法〔特开昭63-44891、特开昭63-12290、特开昭63-14696、特开平5-91887、特开昭63-14697〕。利用对属于Mortierella属Mortierella亚属微生物实施变异处理获得的Δ12不饱和活性低下或缺失的变异株制造蜜得酸(mead酸，5,8,11-二十碳三烯酸)的方法人们也已经了解了(特开平5-91888)。

另外，二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、蜜得酸等不饱和脂肪酸是具有很强且多种生理活性的前列腺素、凝血噁烷、前列环素、白三烯等分子的前体物质，添加了这些前体物质的食品以及动物饲料正受到人们的关注。

例如，花生四烯酸虽然是具有使子宫收缩或松弛作用、扩张血管、降低血压作用等生理活性的前列腺素、凝血噁烷、前列环素、白三烯等分子的前体物质，但近年来，作为婴儿发育的必需成分，花生四烯酸与二十二碳六烯酸(以下也称之DHA)一起研究进展很快。

据Lanting(《柳叶刀》LANCET,Vol.344.1319-1322(1994))等人报道，对出生后3周以上母乳哺育的婴儿和用婴儿奶粉喂养的婴儿进行跟踪调查，直到9岁为止，从行为方面研究脑神经的小的障碍发生率，发现用婴儿奶粉喂养的婴儿的脑障碍发生率是母乳哺育的婴儿的2倍。人们推测这一惊人的结果可能是由于母乳中存在而婴儿奶粉中几乎不存在的DHA或花生四烯酸等高度不饱和脂肪酸与脑的发育有关系。除此之外，高度不饱和脂肪酸与新生儿的脑以及网膜的发育有关系的结果陆续有报道。

然而，虽说是含这些不饱和脂肪酸的油脂安全性很高，但由于有微生物产生的问题，所以并没有充分渗透于社会，而且据《脂类》LIPIDS、Vol.27、No.6、481-483(1992)报道，Mortierella alpina 1S-4株中还产生直到现在还未发现天然存在的24,25-甲叉胆甾-5-烯-3□-醇。因此人们期待着可安全地用于食品和动物饲料的、来自MortiereHa属Mortierella亚属微生物的含不饱和脂肪酸油脂的开发。

本发明目的在于提供能够安心用于食品或动物饲料的，而且能够经济且稳定供给不饱和脂肪酸的微生物油。

本发明人等为了解决上述课题，探索高效制造24,25-甲叉胆甾-5-烯-3□-醇含量少，而含不饱和脂肪酸油脂的方法，详细地研究了各种培养基成分与甾醇组成的关系，结果发现在Mortierella属Mortierella亚属微生物的培养中，通过使用从大豆得到的氮源，可以得到24,25-甲叉胆甾-5-烯-3□-醇组成比小的油脂。由此完成了本发明。

就是说，本发明是有关含不饱和脂肪酸油脂的制造方法的发明，发明涉及在含有从大豆获得的氮源的培养基中培养Mortierella属Mortierella亚属微生物，以及从该培养物中提取含不饱和脂肪酸油脂等过程。

本发明中所谓的不饱和脂肪酸是指碳数在16以上，且含有一个以上双键的脂肪酸，而一般将碳数在18以上且含有2个以上双键的脂肪酸称之高度不饱和脂肪酸，例如γ-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、蜜得酸等。