[发明专利]用于产朊假丝酵母转化的方法和材料

权利要求书

1．一种用于产朊假丝酵母的转化系统，其中所用的宿主酵母细胞能被重组DNA转化，并且该宿主细胞至少有一种生物合成途径的缺陷。

2．一种权利要求1的用于产朊假丝酵母的转化系统，其中宿主酵母细胞至少在一种氨基酸的生物合成途径中有缺陷。

3．一种权利要求2的用于产朊假丝酵母的转化系统，其中所述宿主酵母细胞在尿嘧啶生物合成途径中有缺陷。

4．一种权利要求3的转化系统，其中所述宿主酵母细胞的乳清酸核苷5′-磷酸脱羧酶的酶活性有缺陷。

5．一种权利要求4的转化系统，其中所述宿主酵母细胞是产朊假丝酵母NRRL Y-1084CUT35(保藏号待定)。

6．一种权利要求2的用于产朊假丝酵母的转化系统，其中所用的宿主酵母细胞至少在组氨酸生物合成途径中有缺陷。

7．一种权利要求6的转化系统，其中该宿主酵母细胞的咪唑甘油磷酸脱水酶的酶活性有缺陷。

8．一种权利要求7的转化系统，其中所述宿主酵母细胞是产朊假丝酵母Y-1084TMN3。

9．一种权利要求1的转化系统，其中的重组DNA包含一种能互补宿主的生物合成途径缺陷的功能基因。

10．一种权利要求9的转化系统，其中所述功能基因是产朊假丝酵母的URA3基因。

11．一种权利要求10的转化系统，其中所述重组DNA是质粒pURA5和pUCURA3。

12．一种权利要求9的转化系统，其中所述功能基因是产朊假丝酵母的HIS3基因。

13．一种权利要求12的转化系统，其中的重组DNA是质粒pHCU37和pHCU40。

14．一种能用重组DNA转化的产朊假丝酵母宿主细胞，其中所述宿主至少有一种生物合成途径的缺陷。

15．一种权利要求14的酵母宿主细胞，其中所述宿主细胞至少有一种氨基酸生物合成途径的缺陷。

16．一种权利要求15的酵母宿主细胞，其中所述宿主细胞至少在尿嘧啶生物合成途径有缺陷。

17．一种权利要求16的酵母宿主细胞，其中所述宿主细胞的乳清酸核苷5′-磷酸脱羧酶的酶活性有缺陷。

18．一种权利要求17的酵母宿主细胞，其中所述宿主细胞是产朊假丝酵母NRRL Y-1084CUT35(保藏号待定)。

19．一种权利要求15的酵母宿主细胞，其中所述宿主细胞在组氨酸生物合成途径有缺陷。

20．一种权利要求19的酵母宿主细胞，其中所述宿主细胞的咪唑甘油磷酸脱水酶的酶活性有缺陷。

21．一种权利要求20的酵母宿主细胞，其中它是产朊假丝酵母(NRRL Y-1084)菌株TMN3。

22．一种能转化产朊假丝酵母的酵母宿主细胞的重组DNA材料，其中所述重组DNA材料包含一种能互补宿主的生物合成途径缺陷的功能基因。

23．一种权利要求22的重组DNA材料，其中的功能基因是产朊假丝酵母的URA3基因。

24．一种权利要求23的重组DNA材料，其中重组DNA材料是质粒pURA5以及pUCURA3。

25．一种权利要求22的重组DNA材料，其中的功能基因是产朊假丝酵母的HIS3基因。

26．一种权利要求25的重组DNA材料，其中的重组DNA材料是质粒pHCU37和pHCU40。

27．一种用于产朊假丝酵母转化的方法，其包括：

(a)用碱金属盐处理产朊假丝酵母宿主菌株；

(b)在适于转化的条件下用重组DNA材料接触步骤(a)的细胞产物；

(c)在合适的条件下进行酵母菌宿主菌株的电穿孔；

(d)在选择性的条件下将步骤(c)中的细胞产物接种于培养基。

28．如权利要求27的方法，其中步骤(a)中所用的碱金属盐是浓度为50mM的醋酸锂。