[发明专利]冻干的甲型肝炎减毒活疫苗

说明书

本发明公开一种冻干的甲型肝炎减毒活疫苗，涉及甲型肝炎疫苗剂型的生产技术领域。

目前，国内的甲型肝炎减毒活疫苗系为液体剂型，2～8℃保存有效期仅为半年，-20℃以下冰冻保存有效期仅为12个月，从出厂地到使用现场均要求疫苗严格的冷链运输，如保存和运输不能严格冷链，致使疫苗的病毒滴度下降，影响接种效果，且增加了生产及使用部门的费用。

本发明专利冻干的甲型肝炎减毒活疫苗从根本上解决了疫苗冷链运输问题，实现了常温(22℃)运输，不影响疫苗的病毒滴度，在2～8℃条件下可实现18个月的有效期。

本发明的技术解决方案是由蔗糖、味素、尿素、L-精氨酸、海藻糖配制成冻干保护剂。

基本工艺如下：传代后的人胚肺二倍体细胞培养长成单层后，感染LA-1株甲型肝炎病毒，37℃吸附4小时，补加维持液置35℃培养4周，每周换液一次，洗换加疫苗液，冻化，超声去除细胞碎片，合并疫苗液，加入冻干保护液，保护剂在疫苗最终浓度分别为：明胶0.5～0.7％、蔗糖3～6％、味精0.5～2％、尿素0.3～0.8％、L-精氨酸0.1～0.4％、海藻糖3％。制品入箱后冻结，-40℃保持4小时，开始干燥，冷凝器真空度进入正常状态后保持1小时后开始加温，隔板温度第一小时加温至-20℃，第四小时加温至-10℃，制品保持在-20℃以下，升华，待制品完全成型后，逐渐加温至28℃，控制6～8小时，干燥结束，冻干后的样品应为淡黄色疏松体，水分≤3％(g/g)。

专有设备有转瓶机，医用低温冷冻干燥机等。

本发明积极效果在于：冻干的甲型肝炎减毒活疫苗易于保存，稳定性好，彻底解决了液体剂型甲型肝炎减毒活疫苗的冷链运输及稳定性差等问题，2～8℃制品有效期可从液体剂型的6个月延长至冻干剂型的18个月。

冻干后的甲型肝炎减毒活疫苗加速热稳定性试验结果：

37℃ 7天，前后滴度下降不超过0.5LogTCID₅₀/mL

37℃ 14天，前后滴度下降不超过0.5LogTCID₅₀/mL

2～8℃ 18个月，病毒滴度下降不超过1.0LogTCID₅₀/mL。