[发明专利]定向增殖并表达白介素12的人树突状细胞肿瘤免疫治疗制剂及其制备方法无效
申请号: | 98125868.9 | 申请日: | 1998-12-22 |
公开(公告)号: | CN1260396A | 公开(公告)日: | 2000-07-19 |
发明(设计)人: | 孙宗堂;曲春枫;顾培娣 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所 |
主分类号: | C12N15/24 | 分类号: | C12N15/24;A61K48/00 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林晓红 |
地址: | 100021 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定向 增殖 表达 白介素 12 树突 细胞 肿瘤 免疫 治疗 制剂 及其 制备 方法 | ||
1、一种肿瘤免疫治疗制剂,其包括装载并表达白介素-12的人树突状细胞,其中编码所述的白介素-12的p40亚基的基因具有SEQID NO:1所示序列。
2、制备权利要求1的肿瘤免疫治疗制剂的方法,包括如下步骤:
1)用人干细胞刺激因子包被固相载体培养板;
2)获得抗凝的人外周血单个核细胞,并制成所述细胞的悬液;
3)将所述细胞悬液加到步骤1)的培养板内,于37℃、5%CO2中孵育细胞1-2小时;
4)洗涤细胞,加入含干细胞因子、Flt-3L和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的培养基刺激粘壁的细胞48小时,
5)用含白介素-12基因的载体转染步骤4)得到的细胞,
6)采用含Flt-3L,干细胞刺激因子,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白介素-4,肿瘤坏死因子-α的培养基定向扩增步骤5)所转染的细胞,获得数量可达到107以上水平的表达白介素-12的树突状细胞,作为肿瘤免疫治疗制剂。
3、权利要求2的方法,其中步骤5)中所述的载体中所包含的白介素-12的p40亚基基因具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列。
4、一种编码白介素-12p40亚基的基因,其具有SEQ ID NO:1的序列。
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