[发明专利]特异于β-淀粉状蛋白末端的重组抗体,编码它们的DNA及其使用方法

说明书

本申请根据35USC119(e)要求1997年4月9日提交的美国临时申请No.60/041850的优先权，其全部内容引入本文作为参考。

本发明涉及一种通过向中枢神经系统的细胞中进行基因投送，用于防止或抑制早老性痴呆进一步发展的方法。本发明也涉及一种重组DNA分子，该重组DNA分子含有编码一种特异于淀粉状蛋白质-β肽末端的重组抗体分子的基因，该基因与一种可在中枢神经系统的细胞中表达重组抗体的启动子有效连接，以及它们的药物组合物。

早老性痴呆(AD)的一个主要的组织病理学标志是在扁桃体，海马和新大脑皮质的实质中的神经炎和扩散斑内的淀粉样蛋白质沉积物的存在(Glenner和Wong，1984；Masters等，1985；Sisodia和Price，1995)。淀粉样蛋白质是一个上位概念，表示具有共同β-折叠结构的纤丝聚集体。这些聚集体在刚果红和极化光的存在下显示出双折射性能(Glenner和Wong，1984)。扩散斑相对于神经炎斑被认为是良性的，神经炎斑好像与反应性和退化性过程具有强烈的相关性(Dickson等，1988；Tagliavini等，1988；Yamaguchi等，1989；Yamaguchi等，1992)。神经炎斑的主要成分是一个42氨基酸残基的淀粉样蛋白质-β(Aβ)蛋白质(Miller等，1993；Roher等，1993)，它衍生于较大的β-淀粉样前体蛋白质，βAPP(或APP)(Kang等，1987)。Aβ1-42的产生量小于1-40Aβ肽(Haass等，1992；Seubert等，1992)，但是Aβ1-42的优先沉积是由下述事实造成的，即这一COOH-延伸形式比1-40Aβ难溶，更易于聚集形成反向平行的β折叠片层(Joachim等，1989；Halverson等，1990；Barrow等，1992；Burdick等，1992；Fabian等，1994)。Aβ1-42可作为Aβ1-40聚集体的种子(Jarrett和Lansbury 1993)。

APP基因已被测序，并被发现编码于第21号染色体上(Kang等，1987)。APP基因的表达产生几种695，751和770个氨基酸的含有Aβ的异构体，后面的两个βAPP含有一种与Kunitz丝氨酸蛋白酶抑制剂享有结构和功能同源性的区域(Kang等，1987；Kitaguchi等，1988；Ponte等，1988；Tanzi等，1988；Konig等，1992)。βAPP在神经系统中的功能还不明确，虽然越来越多的证据表明βAPP具有介导神经元的粘连和生长的作用(Schubert等，1989；Saitoh等，1994；Saitoh和Roch，1995)和在G蛋白质连接的信号传导途径中起作用(Nishimoto等，1993)。在培养的细胞中，βAPP通过组成性分泌途径成熟(Weidemann等，1989；Haass等，1992；Sisodia，1992)，并且一种被称为α分泌酶的酶将一些细胞表面结合的βAPP在Aβ区域内切割，(Esch等，1990)，这一事件排除了Aβ淀粉样蛋白质的产生。几个研究工作已经描绘了βAPP加工的两个额外的途径，它们均可产生淀粉样蛋白质：首先，一种内体/溶酶体途径产生一种βAPP相关的膜结合片段的复合体，它们中的一些含有完整的Aβ序列(Haass等，1992；Golde等，1992)；第二，通过还没有完全被理解的机制，Aβ1-40被分泌进条件培养基中，并存在于体内脑脊髓液中(Haass等，1992；Seubert等，1992；Shoji等，1992；Busciglio等，1993)。溶酶体降解不再被认为对Aβ的产生起很大的作用(Sisodia和Price，1995)。还没有鉴定出分别被称为β和γ的负责在Aβ的氨基末端和羧基末端切割的蛋白质裂解酶。直到最近，普遍认为Aβ是通过前体的异常代谢产生的。但是，Aβ在很多细胞中在培养时在条件培养基中和在人类脑脊髓液中的存在表明Aβ是通过细胞的正常功能产生的。