[发明专利]在植物中表达除草剂结合多肽以产生除草剂耐受性

权利要求书

1.一种通过在植物中表达外源除草剂结合多肽制备除草剂耐受性植物的方法。

2.根据权利要求1所述的方法，其中外源除草剂结合多肽是单链抗体片段。

3.根据权利要求1所述的方法，其中外源除草剂结合多肽是完全抗体或其片段。

4.根据权利要求1所述的方法，其中除草剂是5-(2-氯-4-(三氟甲基)苯氧基)-2-硝基苯甲酸。

5.根据权利要求1所述的方法，其中除草剂是7-氯-3-甲基喹啉-8-羧酸。

6.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中植物是单或双子叶植物。

7.根据权利要求6所述的方法，其中植物是烟草。

8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中外源多肽在植物中组成型表达。

9.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中诱导外源多肽在植物中的表达。

10.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中外源多肽在植物叶中表达。

11.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中外源多肽在植物种子中表达。

12.一种植物表达盒，由启动子、信号肽、编码外源杀真菌剂结合多肽的基因、ER滞留信号和终止子组成。

13.根据权利要求12所述的表达盒，其中所用的组成型启动子是CaMV35S启动子。

14.根据权利要求12所述的表达盒，其中要表达的基因是单链抗体片段的基因。

15.根据权利要求12所述的表达盒，其中以与其它功能蛋白如酶、毒素、生色团和结合蛋白翻译融合形式使用的除草剂结合多肽的基因或基因片段是要表达的基因。

16.根据权利要求12所述的表达盒，其中要表达的多肽基因从杂交瘤细胞或借助其它重组方法如抗体噬菌体展示方法获得。

17.根据权利要求12所述的表达盒的用途，用于双子叶或单子叶植物的转化使植物种子或叶特异性地组成型表达外源除草剂结合多肽。

18.根据权利要求17所述的用途，其中将表达盒转入细菌菌株并将所得的重组克隆用于转化双子叶或单子叶植物使植物种子或叶特异性地组成型表达外源杀真菌剂结合多肽。

19.根据权利要求12所述的表达盒的用途，用作选择标记。

20.根据权利要求18或19获得的转化植物的用途，用于制备除草剂结合多肽。

21.一种通过将编码除草剂结合多肽的基因序列导入植物细胞、愈伤组织、完整植物和植物细胞原生质体转化植物的方法。

22.根据权利要求21所述的方法，其中转化借助土壤杆菌、具体地根瘤土壤杆菌进行。

23.根据权利要求21所述的方法，其中转化借助电穿孔进行。

24.根据权利要求21所述的方法，其中转化借助微粒轰击方法进行。

25.除草剂结合多肽的生产方法，通过在植物或植物细胞中表达编码这样的多肽的基因，然后分离多肽。

26.含有根据权利要求12所述的表达盒的植物，其中的表达盒赋予除草剂耐受性。

27.根据权利要求26所述的植物，对5-(2-氯-4-(三氟甲基)苯氧基)-2-硝基苯甲酸有耐受性。

28.根据权利要求26所述的植物，对7-氯-3-甲基喹啉-8-羧酸有耐受性。

29.一种在转基因除草剂抗性农作物中控制不需要的生长的方法，包括针对形成除草剂结合多肽或抗体的农作物使用除草剂。

30.对5-(2-氯-4-(三氟甲基)苯氧基)-2-硝基苯甲酸有高结合亲和性的除草剂结合多肽或抗体，其中除草剂结合多肽或抗体按照权利要求25所述的得到制备。

31.对7-氯-3-甲基喹啉-8-羧酸有高结合亲和性的除草剂结合多肽或抗体，其中除草剂结合多肽或抗体按照权利要求25所述的得到制备。