[发明专利]生物样品中生物分子的噬菌体检测法

权利要求书

1.一种用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，该方法包括一组以下操作：

a)将目的分子固定，同时不破坏其与噬菌体表面上展示的分子相互作用的能力；

b)使如上固定了的目的分子与至少一种重组丝状噬菌体特异地结合，该噬菌体内含有其序列至少部分已知的单链DNA分子，并在衣壳表面展示有能与存在于生物样品中的至少一个目的分子特异结合的至少一种分子；

c)从反应体系中分离以这种方式得到的分子—噬菌体复合体；

d)洗涤除去因分子和噬菌体间非特异相互作用产生的复合体；

e)加入试剂以便进行以下g)中描述的操作；

f)裂解如上挑选出的噬菌体之蛋白衣壳的构成蛋白；

g)经聚合酶链反应(PCR)扩增以上所得DNA；

h)检测如上扩增的DNA。

2.权利要求1所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中f)指出的操作是在DNA发生变性(构成随后g)操作的一个步骤)的温度下进行的，并紧接着进行衣壳蛋白的裂解，并是在同样的温度下进行，从而达到PCR的“热启动”。

3.权利要求1或2所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中的目的分子是抗体。

4.权利要求1至3任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中的目的分子被固定于固相上。

5.权利要求4所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中目的分子经被动吸附固定于固相上。

6.权利要求4所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中利用了该目的分子的特异抗体将它们固定于固相上。

7.权利要求3所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中利用细菌或至少一种选自金黄色葡萄球菌蛋白A、C组链球菌蛋白G以及能结合动物免疫球蛋白的任何其他细菌蛋白质将所述分子固定在固相上。

8.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上展示病毒抗原、其部分或者能模拟它们在受检生物体液中存在的效果的寡肽。

9.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上展示自身抗原、其部分或者能模拟它们在受检生物体液中存在的效果的寡肽。

10.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上展示变应原、其部分或者能模拟它们在受检生物体液中存在的效果的寡肽。

11.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上展示细胞膜受体、该受体的部分或者能模拟它们的生物学活性的寡肽。

12.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上展示特异的细胞膜受体或由此衍生的肽。

13.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上展示预计待测体液中存在其受体的氨基酸类配体。

14.权利要求1至7任何一项所述用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，其中所述噬菌体在衣壳表面上共同展示权利要求11、12、13、14、15和/或16所述分子。

15.用于检测生物样品中如上所描述、举例和要求保护的目的分子存在情况的方法。