[发明专利]脂酰辅酶A∶脂肪醇酰基转移酶

权利要求书

1．重组的DNA构建体，其含有编码具有形成蜡酯之活性的至少一部分酰基转移酶的核酸序列，和与所述酰基转移酶编码序列不天然相关的异源DNA序列。

2．权利要求1的构建体，其中所述蜡酯是由脂肪醇和脂酰辅酶A底物形成的。

3．权利要求1的构建体，其中所述酰基转移酶对具有式为C_2x的碳链的脂酰底物具有活性，其中X选自6-12。

4．权利要求1的构建体，其中所述酰基转移酶对具有式为C_2x的碳链的脂肪醇底物具有活性，其中X选自6-12。

5．权利要求1的构建体，其中所述酰基转移酶编码序列得自种子植物。

6．权利要求1的构建体，其中所述酰基转移酶编码序列得自jojoba。

7．权利要求1的构建体，其进一步含有至少可在宿主细胞中转录所述酰基转移酶编码序列的启动子。

8．权利要求7的构建体，其中所述启动子可在植物细胞中表达所述酰基转移酶编码序列。

9．权利要求8的构建体，其中所述植物细胞是植物胚种子细胞。

10．权利要求7的构建体，其中所述启动子可在细菌细胞中表达所述酰基转移酶编码序列。

11．权利要求8的构建体，其中所述启动子得自在植物种子胚细胞中优先表达的基因。

12．含有权利要求1之构建体的细胞。

13．含有权利要求1之构建体的植物细胞。

14．含有重组构建体的宿主细胞，所述构建体含有编码脂酰还原酶蛋白的核酸序列；和含有编码具有形成蜡酯之活性的酰基转移酶蛋白的核酸序列，其中所述酰基转移酶编码序列对所述宿主细胞而言是异源的，其中所述还原酶和酰基转移酶编码序列处于在所述宿主细胞中起作用的启动子的调节控制之下。

15．权利要求14的宿主细胞，其中所述宿主细胞是植物细胞。

16．权利要求15的植物细胞，其中所述植物细胞是芸苔属植物细胞。

17．含有权利要求1的构建体的芸苔属植物细胞。

18．含有具有形成蜡酯之活性的种子植物酰基转移酶的原核细胞。

19．在宿主细胞中生产蜡酯的方法，该方法包括步骤：

在导致酰基转移酶表达的条件下培养含有重组构建体的宿主细胞，所述构建体含有编码具有由脂肪醇和脂酰辅酶A底物形成蜡酯之活性的至少一部分酰基转移酶的核酸序列，其中所述酰基转移酶编码序列处于在所述细胞中起作用的调节元件的控制之下，其中所述宿主细胞含有所述酰基转移酶的脂肪醇底物。

20．权利要求19的方法，其中所述宿主细胞是原核细胞。

21．权利要求19的方法，其中所述宿主细胞是种子植物胚细胞。

22．权利要求21的方法，其中所述种子植物是芸苔属。

23．权利要求19的方法，其中所述酰基转移酶编码序列得自种子植物。

24．权利要求19的方法，其中由异源重组构建体表达脂酰还原酶编码序列，结果在所述宿主细胞中产生所述蜡合酶的所述脂肪醇底物。

25．含有权利要求19之方法产生的蜡酯的宿主细胞。

26．芸苔属种子细胞，其中所述种子细胞的内在脂质储备物含有蜡酯。

27．权利要求26的芸苔属种子细胞，其中所述蜡酯是长链蜡酯。

28．得自权利要求25之细胞的蜡酯。

29．权利要求1的构建体，其中所述酰基转移酶含有肽序列TIDEYPVMFNYTQK。

30．权利要求1的酰基转移酶，其中所述酰基转移酶含有肽序列FVPAVAPHGGALR。