[发明专利]肿瘤特异性抗原,其制备方法以及它们在免疫和诊断中的应用无效
申请号: | 98810896.8 | 申请日: | 1998-11-02 |
公开(公告)号: | CN1278865A | 公开(公告)日: | 2001-01-03 |
发明(设计)人: | 安德烈亚·阿尼基尼;乔治·帕尔米亚尼;马里亚露依萨·森西;卡蒂亚·特拉韦萨里 | 申请(专利权)人: | 罗什诊断学股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/10;C07K14/705;C12Q1/68;A61K31/70;A61K38/17 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人: | 胡交宇 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肿瘤 特异性 抗原 制备 方法 以及 它们 免疫 诊断 中的 应用 | ||
1.一种肿瘤特异性多肽抗原,它部分是由一种外显子编码的肿瘤抗原的内含子编码的,并且它是通过以下步骤得到的:
a)对从一种肿瘤细胞的可溶性胞质成分中分离的mRNA进行逆转录酶PCR,其中在严谨条件下与一种外显子编码的肿瘤抗原的内含子序列杂交的核酸片段被用作引物;
b)分离所说的PCR产物,在宿主细胞中表达所说的PCR产物或其片段,和分离由该PCR产物或其片段编码的肿瘤特异性抗原,它也与所说的抗原的外显子序列杂交。
2.按照权利要求1所述的肿瘤特异性多肽抗原,其中,所说的PCR产物的8至12个密码子的片段被用于表达。
3.按照权利要求1或2所述的肿瘤特异性多肽抗原,其中,所说的外显子编码的肿瘤抗原是MAGE,BAGE和GAGE,来自酪氨酸酶、MelanAMartl,gp100Pmel7,gp75TRP1或TRP-2的CTL识别抗原决定基。
4.一种由SEQ ID NO:1编码的肿瘤特异性多肽抗原。
5.一种分离由一种外显子编码的肿瘤抗原的内含子部分编码的肿瘤特异性抗原的mRNA的方法,包括以下步骤:
a)对从一种肿瘤细胞的可溶性胞质成分中分离的mRNA进行逆转录酶PCR,其中在严谨条件下与一种外显子编码的肿瘤抗原的内含子序列杂交的核酸片段被用作引物;和
b)分离所说的PCR产物,它也与所说的抗原的外显子序列杂交。
6.一种测定肿瘤特异性细胞毒性T-细胞的增殖的方法,其中,权利要求1至4中任意一项的肿瘤特异性抗原被加入到患者的体液的样品中,它含有抗原呈现细胞和细胞毒性T细胞,测定细胞毒性T细胞的增殖。
7.编码权利要求1至4中任意一项的肿瘤特异性抗原的核酸在制备用于治疗肿瘤疾病的药物中应用。
8.权利要求1至4中任意一项的肿瘤特异性抗原在体内或体内激活来自T前体细胞的细胞毒性T细胞中的应用。
9.一种制备肿瘤特异性多肽抗原的方法,其中所说的肿瘤特异性抗原是通过以下步骤得到的:
a)对从一种肿瘤细胞的可溶性胞质成分中分离的mRNA进行逆转录酶PCR,其中在严谨条件下与一种外显子编码的肿瘤抗原的内含子序列杂交的核酸片段被用作引物;
b)分离所说的PCR产物,在宿主细胞中表达所说的PCR产物或其片段,和分离由该PCR产物或其片段编码的肿瘤特异性抗原,并在严谨条件下与所说的抗原的外显子序列杂交。
10.两种核酸的组合,它们在严谨条件下与一种外显子编码的肿瘤抗原的内含子序列杂交,并且它们可被用作从mRNA的逆转录酶PCR的引物对。
11.由SEQ ID NO:3至SEQ ID NO:9编码的核酸。
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