[发明专利]肿瘤特异性抗原,其制备方法以及它们在免疫和诊断中的应用

说明书

本发明涉及新的肿瘤特异性抗原，其制备方法，以及它们在免疫，特别是在激活细胞毒性、肿瘤特异性T-淋巴细胞，以及对呈现所说的在MHCⅠ类复合体中的肿瘤特异性抗原的肿瘤细胞的特异性诊断中的应用。

免疫系统在针对癌症的免疫监测和肿瘤消退中起着重要的作用。抗肿瘤免疫响应可通过B和T细胞介导，它们识别肿瘤细胞上表达的肿瘤抗原。从来自肿瘤患者最后几年中的外周血淋巴细胞或肿瘤侵润性淋巴细胞(TIL)产生的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)使人们可以对T细胞在人的肿瘤消退中的作用进行评估。

肿瘤侵润性淋巴细胞以及白细胞介素2(IL-2)过继转移进癌症患者自身可介导人肿瘤的消退(Rosenberg等，New Engl．J．Med．319(1988)1676-1680；Rosenberg等，J．Natl．Cancer Inst．86(1994)1159-1166)，提示T细胞在体内肿瘤排斥过程中起着重要的作用。介导体内肿瘤消退的能力与TIL当在体外与同基因型肿瘤共培养时介导特异性裂解和细胞因子释放的能力相关(Barth等，J．Exp．Med．173(1991)647-658)。

为了了解T细胞介导的抗肿瘤响应的分子基础，已鉴定出多种由T细胞识别的编码肿瘤抗原的基因(Boon等，免疫学年度评论12(1994)337-365；Houghton，实验医学杂志180(1994)1-4；Tsomides and Eisen，美国科学院院刊91(1994)3487-3489；Pardoll，自然369(1994)357-358；Rosenberg，Cancer J．Sci．Am．1(1995)90-100)。基于它们的表达类型，这些抗原可被分为几类：

第一类肿瘤抗原包括黑色素瘤和其它的多种组织类型的肿瘤共有的抗原，但不存在于除了精巢和胎盘的正常组织，(例如，MAGE，BAGE和GAGE)(Van der Bruggen等，科学254(1991)1643-1647；Boel等，免疫2(1995)167-175；Van der Bruggen等，实验医学杂志182(1995)689-698)。基于使用由不同的HLAⅠ类等位基因限定的CTL识别的抗原的临床实验正在进行之中(Marchand等，国际癌症杂志63(1995)883-885；Rosenberg，今日免疫学(1997)175-182)，使用的是患有黑色素瘤和其它的肿瘤疾病的患者。考虑到这些抗原和HLAⅠ类等位基因的表达频率，超过60％的高加索人黑色素瘤患者，40％的头部和颈部，和28％的膀胱癌患者适于用这一类中的至少一种抗原进行免疫。在受试的患者中没有检测到副作用。诚然，MAGE，BAGE和GAGE基因表达通常发生在像精原细胞和精母细胞(Ⅱ)的精巢中，它们不表达抗原呈现所需的经典的MHCⅠ类分子(Haas等，Am．J．Reprod．Immunol．Microbio．18(1988)47-57)，因而将不被T细胞靶击。

第二类肿瘤抗原含有在黑色素细胞系列的正常和肿瘤细胞中表达的组织特异性抗原。来自黑色素瘤和正常培养的黑色素细胞上的酪氨酸酶(Brichard等，实验医学杂志178(1993)489-49513)，MelanA^Martl(Coulie等，实验医学杂志180(1994)35-42；Castelli等，实验医学杂志181(1995)363-368；Kawakami等，美国科学院院刊91(1991)3515-3519)，gp100P^mel7(Bakker等，实验医学杂志179(1994)1005-1009；Kawakami等，美国科学院院刊91(1994)6458-6462)，gp75^TRP1(Wang等，实验医学杂志181(1995)799-804)和TRP-2(Wang等，实验医学杂志184(1996)2207-2216)CTL识别抗原决定基可在体外从许多黑色素瘤患者中扩增出来。因而，很大一部分黑色素瘤患者可能受益于诱导针对这些抗原的T细胞响应的免疫治疗。实际上，在几乎所有的黑色素瘤中都表达分化的抗原，并且它们中的大部分通过HLA-A2等位基因呈现于免疫效应子，该等位基因以极高的频率存在于各个种族的人群中。但是，必须认真考虑这些治疗中针对正常组织(即皮肤黑色素细胞和色素沉着的视网膜细胞)的交叉反应性所带来的副作用。