[发明专利]革兰氏阳性微生物甲酸途径

权利要求书

1．一种用于在革兰氏阳性微生物中生产产品的方法，其包括：

a)获得能表达所述产品的微生物，所述微生物包含ⅰ)甲酸运输相关蛋白1(FTAP1)和ⅱ)甲酸运输相关蛋白2(FTAP2)之一或二者兼有；和

b)在存在甲酸并适合所述产品生产的条件下培养所述微生物。

2．权利要求1的方法，其中所述产品是重组蛋白。

3．权利要求2的方法，其中所述重组蛋白与所述微生物同源。

4．权利要求2的方法，其中所述重组蛋白与所述微生物异源。

5．权利要求1的方法，其中所述革兰氏阳性微生物是芽孢杆菌属。

6．权利要求5的方法，其中所述芽孢杆菌属包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、短芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、淀粉液化芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌。

7．权利要求2的方法，其中所述重组蛋白包括激素、酶、生长因子和细胞因子。

8．权利要求7的方法，其中所述蛋白是酶。

9．权利要求8的方法，其中所述酶包括蛋白酶、脂酶、淀粉酶、支链淀粉酶、纤维素酶、葡萄糖异构酶、漆酶和蛋白质二硫键异构酶。

10．权利要求1的方法，其中所述FTAP1具有图1所示的氨基酸序列。

11．权利要求1的方法，其中所述FTAP2具有图2所示的氨基酸序列。

12．一种在革兰氏阳性微生物中生产产品的方法，其包括：

a)获得可表达所述产品并在编码PurU的核酸中含有一个突变的革兰氏阳性微生物，所述突变导致所述微生物PurU活性生产的抑制；

b)在适合生产所述产品的条件下培养所述微生物。  

13．权利要求12的方法，其中所述产品是重组蛋白。

14．权利要求13的方法，其中所述重组蛋白与所述革兰氏阳性微生物同源。

15．权利要求13的方法，其中所述重组蛋白与所述革兰氏阳性微生物异源。

16．权利要求13的方法，其中所述革兰氏阳性微生物是芽孢杆菌属。

17．权利要求16的方法，其中所述芽孢杆菌属包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、短芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、淀粉液化芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌。

18．权利要求13的方法，其中所述重组蛋白包括激素、酶、生长因子和细胞因子。

19．权利要求18的方法，其中所述蛋白是酶。

20．权利要求19的方法，其中所述酶包括蛋白酶、脂酶、淀粉酶、支链淀粉酶、纤维素酶、葡萄糖异构酶、漆酶和蛋白质二硫键异构酶。

21．一种在革兰氏阳性微生物中生产产品的方法，其包括步骤：

a)获得可表达所述产品并在编码FTAP1和FTAP2的核酸之一或两者中有一个突变的革兰氏阳性微生物，所述突变导致所述微生物FTAP1和／或FTAP2活性生产的抑制；和

b)在适合生产所述产品的条件下培养所述微生物。

22．一种在革兰氏阳性微生物中生产产品的方法，其包括步骤：

a)获得可表达所述产品的革兰氏阳性微生物；

b)修饰所述微生物的FMD表达；和

c)在适合生产所述产品的条件下培养所述微生物。

23．权利要求21或22的方法，其中所述产品是重组蛋白。

24．一种改变革兰氏阳性微生物生长的方法，其包括修改所述革兰氏阳性微生物中的甲酸运输。

25．一种革兰氏阳性微生物，其包括编码FTAP1和FTAP2之一或两者的分离的核酸。

26．一种革兰氏阳性微生物，其PurU编码基因中含有一个突变，所述突变导致PurU活性的抑制。