[发明专利]多相催化蛋白酶抑制剂用作抗肿瘤剂

说明书

相关申请的相互参考

本申请要求1997年12月16日申请、序号为60／069，804的美国临时申请，和1998年12月15日申请、名称为“多相蛋白酶抑制剂用作抗肿瘤剂”的美国专利申请的优先权。上述专利申请的内容通过参考其全文引入本文。

发明领域

本发明涉及美国专利5，614，649和5，550，262所公开的多相催化蛋白酶(MCP)特异性抑制剂，用作肿瘤细胞程序性细胞死亡(即，编程性细胞死亡)的诱导剂，更具体地说用作抗肿瘤剂。

发明背景Ⅰ．癌病症中的编程性细胞死亡

编程性细胞死亡是，例如，程序性细胞死亡的主动过程，它在从蠕虫到人的进化过程中一直是保守的(Jacobson，M．J．，等，细胞，88，347-354，1997)。编程性细胞死亡发生在两个生理阶段，即定型和执行。编程性细胞死亡的执行由表现罕见底物特异性，即在天冬氨酸(“Asp”)残基之后酶切的caspase家族特异性蛋白酶的激活引发(Martin，S．J．和Green，D．R，细胞，82：349-352，1995)。到目前为止，至少鉴定和克隆了十个Caspase的同源体(Alnemri，E．S．，等，细胞87，171，1996)。caspase的激活导致编程性细胞死亡，很可能经重要细胞蛋白质的蛋白酶解切割导致。曾报道，很多蛋白质，包括聚(ADP)-核糖聚合酶(“PARP”，Lazebnik，Y．A．，等，自然，371：346-347，1994)、肌动蛋白(Kayalar，C．等，PNAS USA，93：2234-2238，1996)、固醇调控结合蛋白(Wang，X．，等，EMBO J．，15：1012-1020，1996)和DNA-依赖性蛋白激酶(Song，Q．，等，EMBO J．，15：3238-3246，1996)，在编程性细胞死亡过程中，在Asp残基之后被酶切，表明caspase是切割酶。曾报道(An，B．，和Dou，Q．P．，癌症研究56：438-442，1996)，当用抗癌剂处理HL-60或U937细胞时，成视网膜细胞瘤(RB)蛋白，作为一种重要的细胞周期调节物和肿瘤抑制物(Weinberg，R．A．，细胞，81：323-330，1995)，被蛋白酶解切割成被称为“p68”和“p48”的两种主要片段。据报道，不同的caspase抑制剂例如YVAD-CMK(An，B．，和Dou，Q．P．，癌症研究，同上)、Bcl-2肿瘤蛋白质或者牛痘病毒CrmA蛋白质(Dou，Q．P．等，细胞生化杂志，64；586-594，1997)可以抑制RB内切和编程性细胞死亡。之后，据其它课题组报道，在编程性细胞死亡过程中，RB还被caspase 3-样蛋白酶从其C-末端酶切(Janicke，R．U．，等，EMBO J．15，6969-6978，1996；Chen，W．，等，肿瘤基因14，1243-1248，1997；Tan，X．，等，生物化学杂志，272：9613-9616，1997)。还曾报道，内核小体的DNA断裂之前，RB首先脱磷酸化(Dou，Q．P．，等，PNAS USA，92：9019-9023，1995；Wang，H．，等，肿瘤基因，13：373-379，1996；和Morana，等，生物化学杂志，271：18263-18271，1996)。

编程性细胞死亡程序的激活是目前治疗人类癌症的的策略。已经证明X-照射和化疗药物通过诱导编程性细胞死亡来杀死一些肿瘤细胞(Fisher，D．E．，细胞78，539-542，1994)。不幸的是，目前大多数人类癌症已经对这种治疗产生抗性(Harrison，D．J．，病理学杂志(J．Patho．)175，7-12，1995)。虽然在人类癌症中这种多药物抗性形成的分子机制还不清楚，但曾提出，该过程涉及Bcl-2的过度表达(Reed，J．C．，细胞生物学杂志124，1-6，1994)，肿瘤抑制基因“p53”的失活(Milner，天然药物杂志，1，789-880，1995)，或者通过转录调节子NF-κB作用的生存程序的激活(Beg，A．A．和Baltimore，D．，科学274：782-784，1996；Wang等，科学274：784-787，1996)。Ⅱ．多相催化蛋白酶(MCP)