[发明专利]杆状病毒载体表达系统中蛋白质的表达

权利要求书

1．提高在昆虫细胞培养物中生产的重组蛋白质的产量的方法，包括选择编码所述蛋白质的重组杆状病毒，在培养容器的生长培养基中生长昆虫细胞，和用至少一个杆状病毒的接种物以感染复数小于0.01感染细胞。

2．根据权利要求1的方法，包括在体积足够含有2升，更优选地10升，更优选地50升生长培养基，更优选地250升生长培养基的培养容器中生长细胞。

3．根据权利要求1或2的方法，包括在细胞密度为1×10⁵到5×10⁶个细胞/毫升，更优选地5×10⁵到1.5×10⁶个细胞/毫升时感染细胞。

4．根据权利要求1，2或3的方法，包括以≤0.005的感染复数感染细胞。

5．根据权利要求4的方法，感染复数≤0.003。

6．根据权利要求1-5任何一项所述的方法，包括选择在p10启动子控制下表达需要的蛋白质的重组杆状病毒。

7．根据权利要求1-6任何一项所述的方法，包括优选地在培养容器如能够适当搅拌的发酵罐中悬浮生长昆虫细胞。

8．根据权利要求1-7任何一项生产重组瘟病毒E2或E^rns蛋白或其片段的方法。

9．增加在昆虫细胞培养物中生产的重组瘟病毒E2或E^rns蛋白或其片段的方法，特征是收获时生长培养基中的所述蛋白质(片段)的最后浓度至少100微克/毫升。

10．根据权利要求9所述的方法，其中浓度大于120微克/毫升，或至少150微克/毫升，更优选地至少200微克/毫升。

11．根据权利要求1-10任何一项所述的方法在生产抗原物质中的用途。

12．根据权利要求11所述的用途，其中抗原物质是瘟病毒蛋白质(片段)，更优选地是典型性猪瘟病毒蛋白质(片段)。

13．含有利用权利要求1-10任何一项方法获得的抗原物质的疫苗。

14．含有重组瘟病毒E2或E^rns蛋白或其片段的疫苗，特征是它不是免疫亲和纯化的，并且优选地在单剂量接种一次后赋予PD95水平的抵抗瘟病毒感染的保护性。

15．根据权利要求14所述的疫苗，其中瘟病毒感染是典型性猪瘟感染。

16．根据权利要求13-15的任何一项所述的疫苗，另外还含有佐剂，所述的佐剂优选地含有双倍油包水乳剂。

17．生产在生长培养基中收获时浓度至少为15微克/毫升的重组促卵泡激素，α单位和/或β单位和其复合物和片段的方法。

18．根据权利要求17所述的方法，其中浓度至少为20微克/毫升，更优选地至少25微克/毫升。

19．根据权利要求17或18所述的方法，包括用在培养物中表达α单位的一个杆状病毒和表达β单位的另一个杆状病毒感染昆虫细胞培养物。

20．根据权利要求1-7或17-19任何一项所述的方法在生产激素类物质中的用途。

21．根据权利要求20所述的用途，用于生产激素类物质掺入药物组合物治疗生殖疾病。