[发明专利]直接快速分析微生物所含生化成分的方法与其组成无效

专利信息
申请号: 99103137.7 申请日: 1999-03-23
公开(公告)号: CN1243955A 公开(公告)日: 2000-02-09
发明(设计)人: 韩晓亮;王万恒 申请(专利权)人: 韩晓亮;王万恒
主分类号: G01N33/50 分类号: G01N33/50
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100080 北京市海*** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 直接 快速 分析 微生物 生化 成分 方法 与其 组成
【权利要求书】:

1.一种用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:本方法不需要将核酸分子预先与其它细胞成分分离,该方法包涵下述内容和步骤:

(a)将上述微生物悬浮于第一溶液中,致使上述微生物溶解并释放上述核分子,形成第一悬浮液;

(b)将上述第一悬浮液在至少65℃左右加热至少10秒钟左右,该步骤并非必须;

(c)将上述第一悬浮液和第二溶液合并形成第二悬浮液,第二溶液中含有限制性核酸内切酶,用于消化上述核酸分子;

(d)检测第二悬浮液中的核酸分子。

2.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:第一溶液含有约0.1%(体积/体积)到约5%(体积/体积)的非离子去污剂。

3.根据权利要求2所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的非离子去污剂由Triton X-100,Tween-20和NP-40当中所选取。

4.根据权利要求2所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的非离子去污剂是Triton X-100。

5.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的第一溶液是水。

6.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的微生物选于细菌,真菌,真核细胞和噬菌体。

7.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的微生物是细菌。

8.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:用凝胶电泳的方法来实行(d)步骤的检测。

9.根据权利要求8所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的凝胶电脉能够辨别所述核酸分子量的大小。

10.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的核酸分子几乎完全被所述的限制性核酸内切酶所消化。

11.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的第1溶液中不含SDS或EDTA。

12.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的核酸分子不是微生物的内源性核酸分子。

13.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:没有用多聚酶链反应的方法来扩增核酸分子的步骤。

14.根据权利要求1所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的第一溶液含有Tris-HCl。

15.一种用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:本方法不需要将核酸分子预先与其它细胞成份分离,该方法包涵下述内容的步骤:

(a)将所述的微生物悬浮于含有限制性核酸内切酶的溶液中,该溶液能裂解所述的微生物并从该微生物中释出核酸分子,所述的限制性核酸内切酶消化所释出的核酸分子,所述的悬浮步骤产生出了悬浮液;

(b)在该悬浮液中检测所述的核酸分子。

16.根据权利要求15所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的溶液中含有0.1%(体积/体积)到5%(体积/体积)的非离子去污剂。

17.一种用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:本方法不需要将生物化学组分预先与其它的细胞成份分离,该方法包涵下述内容的步骤:

(a)将所述的微生物悬浮于第一溶液中形成第一悬浮液,在第1溶液中含有有效阻止DNA酶活性的组份;

(b)将第一悬浮液和第二溶液合并形成第二悬浮液,第二溶液中含有碱性缓冲液和去污剂,所述的生物化学组份由所述的微生物中释出;

(c)检测第二悬浮液中的生物化学组份。

18.根据权利要求17所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的生物化学组份是核酸分子。

19.根据权利要求18所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述的核酸分子是DNA。

20.根据权利要求17所述的用于检测微生物中核酸分子的方法,其特征是:所述能有效阻止DNA酶活性的组份是EDTA。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于韩晓亮;王万恒,未经韩晓亮;王万恒许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/99103137.7/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top