[发明专利]烷基醚型高效液相色谱反相填料及其制备方法

说明书

本发明属于一种高效液相色谱用的新型高效液相色谱填料的制备方法，具体涉及到一种新型醚型高效液相色谱反相填料的制备方法。

色谱柱是高效液相色谱仪的心脏，填料则是色谱柱的核心。反相填料在生物、化学、药物工业等领域得到了广泛的应用，根据文献[J.G.Dorsey and W.T.Cooper，B.A.Siles，J.P．Foley，H.G.Borth，Anal.Chem.，70(1998)591R]，反相色谱仍然是色谱方法中最重要的模式。如今，在世界范围内有超过600种商品化的反相柱，它们以具有不同的烷基链长(如丁基、辛基、十六烷基或十八烷基)，以及不同的选择性为其特征。大量新的或更好的反相柱也不断地投入市场[3]。为得到较好RP-HPLC分离，通常应用不同类型的色谱柱配合流动相变化便可对目标待分离体系的色谱条件进行优化[K.Kimata，K.Iwaguchi，S.Onishi，K.Jinno，R.Ekstee，K.Hosoya，J.Chromatogr.Sci.，1989，721-728]。

目前，制备以硅胶为基质的反相填料的方法主要有两类，一种是利用硅胶的硅烷化反应进行，另一种是用硅烷类化合物的直接缩合，以溶胶-凝胶反应得到。在第一类中，多是以二氯、三氯或一氯代硅烷为试剂进行合成的。氯硅烷是是较贵的试剂，而且氯硅烷易于在潮湿的空气中与水气反应，故在合成中所作的保护措施无疑会增加其成本；另一方面，键合的重现性难以控制，如处理不当难免产生对某些物质的非特异性吸附。除氯硅烷外，在实际应用中，有许多固定相是通过一含有活性功能团(如氨基、环氧基等)的中间硅烷化试剂连接至硅胶表面的。γ-环氧丙基氧丙基三甲氧基硅烷(KH560)是广泛使用的重要的中间硅烷偶连试剂之一。Chang等[K.Kimata，K.Iwaguchi，S.Onishi，K.Jinno，R.Ekstee，K.Hosoya，J.Chromatogr.Sci.，1989，721-728]曾叙述了环氧基在键合相制备中的使用，迄今为止，已以它制备出了不同类型的高效液相色谱填料，如疏水相互作用色谱填料[V．Smigol，F．Sveec，J.J.M.Frecheet，Anal.Chem.，66(1994)2129]，排阻色谱填料[J.P.Chang，J.G.An，Chromatographia，25(4)(1988)350]，高效液相亲和色谱填料[R.Ovalle，Anal.Chem.，229(1995)1]，离子交换填料[K.Kimata，K.Iwaguchi，S.Onishi，K.Jinno，R.Ekstee，K.Hosoya，J.Chromatogr.Sci.，1989，721-728]等。但未见有用以制备长链烷基链反相色谱填料的报导。

本发明就是提供一种烷基醚型高效液相色谱反相填料和其制备方法。

本发明烷基醚型高效液相色谱反相填料具有如下所示结构：

本发明采用非氯硅烷型合成新工艺，即一种基于带有环氧基的γ-环氧丙基氧丙基三甲氧基硅烷的新的合成路线，用以合成烷基醚型高效液相色谱反相填料。填料的合成可以采用一步法，也可以采用两步法的工艺。填料的制备按下列步骤进行：

1、一步法：(1)令一份硅胶与0.3～0.6份KH560反应，生成环氧基化硅胶，再令其在0.1～20％份三氟化硼乙醚(BF₃.Et₂O)催化下与(0.5～5.0)份烷基醇于60～180℃下反应2～48小时，反应产物洗净，真空干燥；(2)取一份上述干燥产物与含0.1-1份封头试剂的干燥有机溶剂混合，于60～150℃反应2～48小时。所用的封头试剂可以是任何甲基硅烷，但最好用三甲基型的，如三甲基氯硅烷、六甲基二硅胺烷等。所用有机溶剂可以是不与氯硅烷及硅羟基发生化学反应的任何有机溶剂，如甲苯、二氧六环等。反应产物以有机溶剂洗净，真空干燥后即可得产品烷基醚型高效反相填料。

2二步法：(1)先令一份KH560与1到5份的烷基醇于60～180℃，在(0.1％～20％)份三氟化硼乙醚催化下相互反应，此反应可使用或不使用有机溶剂，除可与环氧基易起反应者之外无特别限制。反应后，目的产物应以常规方法适当纯化。(2)取一份纯化的产物，令其与0.1～2份硅胶，在常用有机溶剂中无特别限制，于60～180℃反应2～48小时，产物以有机溶剂洗净，真空烘干。产物同一步法进行封头处理。