[发明专利]糖尿病鉴别试剂盒及其制作方法

权利要求书

1)检测64KD抗体的ELISA试剂盒，包括(a)酶联反应板，(b)HRP-羊抗人IgG，(c)洗涤液，(d)酶标抗体稀释液，(e)底物稀释液，(f)底物0PD，(g)终止液，(h)阳性血清，其特征是：将卡介苗(BCG)65KD热休克蛋白包被(a)酶联反应板；(b)HRP-羊抗人IgG(辣根过氧化物标记的羊抗人IgG)，1∶800稀释，管装两种规格：15μl或7．5μl；(c)洗涤液，瓶装30ml或15ml，20倍浓缩含0．05％的吐温-20的PH74，0．01 mol／L磷酸盐缓冲液(使用时稀释20倍)；(d)酶标抗体稀释液(洗涤液加1％～2％的小牛血清白蛋白200μl)；(e)底物稀释液(0．1mol／L的磷酸氢二钠10．28ml加上0．05mol／L枸橼酸9．72ml)；(f)底物OPD(邻苯二胺，片状，3片，进口产品，Sigma公司出品)；(g)终止液2mol／l硫酸；(h)阳性血清，50μl。

2)根据权利要求1所述的检测64KD抗体的ELISA试剂盒，其特征是：酶联反应板上包被的卡介苗(BCG)65KD热体克蛋白用PH(8-10)的碳酸盐缓冲液定量至1μg～1000μg／ml，包被酶联反应板0．1～50μg／孔，用含1～5％的小牛血清自蛋白的磷酸盐缓冲液封闭。

3)根据权利要求1或权利要求2所述的检测64KD抗体的ELISA试剂盒，其特征是：用磷酸缓冲液封闭的条件为37℃下1小时。

4)根据权利要求1或权利要求2所述的检测64KD抗体的ELISA试剂盒，其特征是：用磷酸缓冲液封闭的条件为4℃下12小时。

5)一种制造权利要求1所述试剂盒的制作方法，其特征是：酶联反应板上包被的卡介苗(BCG)65KD热休克蛋白以如下方法制得：BCG接种于培养基中10～14天，40℃～45℃条件下水浴1～4小时。