[发明专利]非同步链延伸聚合酶链反应

权利要求书

1、一种将含有寡重复序列、引物、耐热DNA聚合酶、dNTP底物、模板DNA、镁离子、PCR缓冲液、超纯水等的反应体系进行高温、低温、中低温、中温反复热循环而达到目的DNA片段大量扩增的DNA体外扩增技术，其中的寡重复序列为依据靶DNA的重复序列合成的与其一条链的一小段重复序列互补的寡核苷酸，其3’-末端经过修饰失去了延伸能力；该寡重复序列在热循环过程中的低温和中低温阶段时，与相应的互补模板链的重复序列退火，从而抑制模板之间的重复序列相互退火，使另一条模板链首先指导合成完整的互补新链；在热循环过程中的中温阶段时，从与其结合的模板链上脱离下来，该模板随即指导合成完整互补新链；经过多次的热循环，产生大量的目的DNA片段。

2、根据权利要求1所述的DNA体外扩增技术，其特征在于反应体系中含有寡重复序列。

3、根据权利要求2所述的寡重复序列，其特征为系依据靶DNA的重复序列合成的3’-末端经过修饰失去延伸能力的与一条链的重复序列互补的15-25nt的寡核苷酸。

4、根据权利要求3所述的3’-末端经过修饰的失去延伸能力的寡核苷酸，其3’-末端进行磷酸化或加双脱氧核苷酸修饰，或使用能够与正引物特异结合但又不能在耐热DNA聚合酶的作用下延伸的其他物质，如肽核酸(PNA)。

5、根据权利要求1所述的DNA体外扩增技术，依据该技术装配的DNA体外扩增试剂盒。