[发明专利]抗HPV16E6核酶质粒及其在人乳头瘤病毒与肿瘤治疗中的应用无效
| 申请号： | 99116265.X | 申请日： | 1999-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN1241636A | 公开（公告）日： | 2000-01-19 |
| 发明（设计）人： | 张积仁;郑燕芳 | 申请（专利权）人： | 第一军医大学珠江医院 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12N15/85;A61K48/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510282 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hpv16e6 质粒 及其 乳头 病毒 肿瘤 治疗 中的 应用 | ||
1.抗HPV16E6(人乳头瘤病毒16型E6基因)核酶的真核表达质粒，其特征在于：(1)设计：以HPV16基因序列为分析序列，采用计算机软件针对HPV16E6基因设计特异性锤头状核酶，该核酶的靶位点是E6基因上170位点。(2)人工合成了抗16HRz ribozyme基因(各两条链)，并引入酶切位点，以便于克隆组装。A.5’CTAGATATCATGTACTGATGAGTCCGTGAGGACGAAAGTTGTTTGGGTAC3’
Xba I Kpn IB.5’CCAAACAACTTTCGTCCTCACGGACTCATCAGTACATGATAT3’(3)将抗16HRz ribozyme基因装入原核表达质粒中，进行核酶的体外切割实验，将该核酶基因克隆于PcDNA3等真核表达载体中，构成抗HPV16E6核酶的真核表达质粒。可溶于水或TE等缓冲液配成溶液，或用冷冻干燥法制成干粉。
2.按照权利要求1所述的质粒，其特征在于溶液中有效浓度0.1ug/ul-100ug/ul.
3.按照权利要求1所述的质粒，其特征在于溶液中最佳浓度0.1ug/ul-10ug/ul.
4.按照权利要求1至3所述的质粒，该质粒借助于脂质体或病毒等载体的携带，用于人乳头瘤病毒及其相关疾病，如宫颈癌、喉癌、口腔癌等，的治疗与研究。
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