[发明专利]系列通用型腺病毒伴随病毒载体的构建及用途

权利要求书

本发明属于生物技术发明领域，具体涉及用于基因转移、基因治疗和真核基因表达的一系列通用型腺病毒伴随病毒(adeno-associated virus，AAV)载体质粒。

1.本发明构建的通用型AAV载体质粒pWAV-1、pWAV-2，其特征是含有2型AAV(AAV-2)基因组两端的ITR，在两个ITR之间依次为巨细胞病毒立早增强子和启动子、多克隆位点和polyA信号。

2.本发明构建的通用型AAV载体质粒pSNAV-1，其特征是含有AAV-2基因组两端的ITR，在两个ITR之间依次为巨细胞病毒立早增强子和启动子、多克隆位点和polyA信号，在ITR外侧具有新霉素抗性基因表达盒。

3.本发明构建的通用型AAV载体质粒pSNAV-2，其特征是含有AAV-2基因组两端的ITR，在两个ITR之间具有巨细胞病毒立早增强子和启动子、多克隆位点、polyA信号和新霉素抗性基因表达盒。

4.本发明构建的通用型AAV载体质粒用于携带外源基因，其特征是将外源基因插入通用型AAV载体质粒的多克隆位点。

5.本发明构建的通用型AAV载体质粒用于产生携带外源基因的重组AAV。

6.本发明构建的通用型AAV载体质粒用于建立稳定携带重组AAV载体的细胞株，其特征在于细胞株中含有稳定整合在染色体中的AAV ITRs及外源基因表达单位。

7.本发明构建的通用型AAV载体质粒用于真核细胞表达外源基因。

8.根据权利要求1、2、3，多克隆位点前为SV40早期增强子和启动子。

9.根据权利要求1、2、3，多克隆位点前为Rous肉瘤病毒基因组长末端重复区。

10.根据权利要求1、2、3，多克隆位点前为单纯疱疹病毒胸苷激酶启动子。

11.根据权利要求2、3，选择标记基因为潮霉素抗性基因。

12.根据权利要求2、3，选择标记基因为二氢叶酸还原酶基因。

13.根据权利要求2、3，选择标记基因为黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因。    

14.根据权利要求2、3，选择标记基因为腺苷脱氨酶基因。