[发明专利]用于保护PEG-α干扰素缀合物的制剂

说明书

在本公开文本的上下文中参考了各种出版物、专利和专利申请。将这些出版物、专利和专利申请的公开内容引入本文作为参考。

发明领域

本发明涉及用于使PEG-α干扰素缀合物在冻干过程中和之后保持稳定的制剂及其制备方法和用途。

发明背景

各种天然和重组蛋白质具有药物用途。一旦将它们纯化、分离并配成药品，则可以将它们经非肠道途径进行给药，而用于不同的医疗适应症。然而，非肠道途径给予的蛋白质可以是免疫原性的、可以是相对不溶于水的且可以具有较短的药理半衰期。因此，难以使所述的蛋白质在患者体内达到有治疗作用的血药浓度。

通过将所述的蛋白质与诸如聚乙二醇的聚合物缀合可以克服这些难题。Davis等在美国专利4，179，337中公开了将聚乙二醇(PEG)与蛋白质诸如酶和胰岛素缀合以获得具有低于原始蛋白质的免疫原性作用并仍可保持其基本比例的药理活性的缀合物的技术方案。Veronese等(《实用生物化学和生物技术》(Applied Biochem.and Biotech.)11：141-152，1985)公开了用氯甲酸苯酯使聚乙二醇活化以修饰核糖核酸酶和超氧物歧化酶的技术方案。Katre等在美国专利4，766，106和4，917，888中还公开了通过聚合物缀合使蛋白质增溶的技术方案。同样，可以将PEG和其它聚合物与重组蛋白质缀合以便降低免疫原性并提高半衰期。参见Nitecki等在美国专利4，902，502；Enzon在国际专利申请PCT/US 90/02133；Nishimura等在欧洲专利申请154，316和Tomasi在国际专利申请PCT/US85/02572中所述。例如，公知α干扰素-2b可有效地治疗疾病情况诸如肾细胞癌、与AIDS相关的卡波西肉瘤、慢性和急性乙型肝炎、慢性和急性非甲、非乙/丙型肝炎和丙型肝炎。提高α干扰素-2b的药理半衰期会改善对这些疾病的治疗。

尽管制备蛋白质-聚合物的缀合物是有益的，但是不能将它们进行实际应用，除非可以在制备过程中和提供保健者的分配过程中将它们储存延长的时间期限。然而，某些蛋白质-聚合物的缀合物甚至在冷冻溶液中也会快速变质。冻干法(也称冷冻干燥)是一种可以以克服这种缺陷的形式提供药物的方法。

冻干法是一种将水在组合物被冷冻后从其中升华的方法。在这种方法中，可以将在一段时间期限内在水溶液中相对不稳定的药物和生物制剂以一种方便加工的液态形式放入剂量容器、不使用加热破坏的方式干燥并以干态形式储存延长的期限。

由于在各剂量中活性物质的总质量较低，所以包括蛋白质-聚合物的缀合物在内的大多数药物和生物制剂的配制需要附加组分以在冻干过程中保护活性组分。例如，作为低浓度水溶液装入剂量容器中的药物可以受到真空冻干过程中物理性损耗的影响并吸附在所述容器上。冻干制剂经常含有可增加固体物质的量的填充组分以及可使活性成分免受破坏的冷冻保护剂、溶解保护剂(lyoprotectant)和其它稳定剂。然而，保护给定类型药物的特定制剂必须以实验为基础来确定。

存在一种对适于使蛋白质-聚合物的缀合物、且特别是PEG-α干扰素缀合物免受冻干过程中破坏的制剂的需求。这类制剂应使PEG-干扰素α-聚合物的缀合物在延长时间期限内维持其生物活性、物理稳定性和化学稳定性。

发明概括

本发明提供了在冻干过程中和之后使得PEG-α干扰素缀合物保持稳定的制剂。

在一个实施方案中，本发明提供了包括PEG-干扰素缀合物、缓冲剂、稳定剂和冷冻保护剂的的含水制剂。本发明还涉及用于制备稳定的含水制剂溶液的方法，所述的含水制剂溶液包括将缓冲剂、稳定剂、冷冻保护剂和溶剂与有效量的PEG-α干扰素缀合物混合。在本发明方法的优选方面中，制备该制剂并维持该制剂基本上不含溶解的氧气，并且将上述制剂液面上部空间的惰性气体维持在按体积计氧气的值低于约4％。

本发明并不限于用于所述溶液成分的特殊化学物质。然而，在一个优选的实施方案中，缓冲剂是磷酸钠；稳定剂是聚(氧-1，2-乙二基)衍生物；冷冻保护剂是蔗糖且溶剂是水。在这样一个实施方案中，磷酸钠可以包括混有磷酸一钠二水合物的无水磷酸二钠。