[发明专利]氧化胸腺素β4

说明书

本发明涉及从类固醇处理过的单核细胞中分离出来的肽因子。尤其是，本发明涉及用于替代类固醇治疗的肽因子。

类固醇被有效地用于抗炎症性疾病，例如哮喘、湿疹、过敏反应和风湿性疾病如类风湿性关节炎。然而，类固醇具有严重的副作用，因而仅在非类固醇抗炎药物不能奏效的情况下使用。

单核细胞是重要的免疫效应细胞，在细胞免疫中发挥着至关重要的作用。除了其在炎症部位的抗原呈递和吞噬活性外，外周血单核细胞还参与多种与调节嗜中性白细胞反应有关的炎性酶原和多肽细胞因子的合成和释放。这些成分的产生可被糖皮质激素抑制，因此，认为这即是糖皮质激素抗炎反应的基础。

关注类固醇诱导的因子对嗜中性白细胞迁移的影响，最初是为了阐明抗炎机制。皮质类固醇使许多前炎症介质下调(Lew等，1988；Almawi等1991:Standford等1992)，而有些作用则可以解释为使抗炎介质上调。

嗜中性白细胞迁移刺激类固醇诱导的因子的活性，提示分散移动旨在防止细胞聚集在一个部位，而这对于终止炎症反应是很重要的。

Stevenson(1973,1974,1978)证实：人单核细胞在与抗炎皮质类固醇一起孵育时释放蛋白酶敏感因子，后者增加嗜中性白细胞从短毛细管中的细胞团迁移。

后来的研究证实，用采集自接受类固醇治疗的患者的白细胞也观察到刺激嗜中性白细胞迁移的现象。

最近，Chettibi等(1993,1994)使用能够研究细胞在蛋白包被的玻璃盖玻片上迁移过程的自动细胞跟踪分析法研究了类固醇诱导的对嗜中性白细胞迁移行为的刺激作用。这些研究是如下测定的：

1．类固醇-处理的单核细胞上清液(STMS)使得人嗜中性白细胞移动速度显著增加，而使人嗜中性白细胞对蛋白包被的玻片的粘附显著下降。相反，对照单核细胞上清液对嗜中性白细胞的移动速度影响较小，但是粘附性大大增加。

2．在有或没有血清的条件下，37℃与10^-6M地塞米松孵育24 h后制得的上清液的活性相同。

3．类固醇-处理的单核细胞上清液对人外周血嗜中性白细胞移动速度的作用不受兔抗脂蛋白1-6多克隆抗血清的影响。

4．能够阻断IL-8对人嗜中性白细胞移动速度作用的兔抗白介素-8抗体，并不能拮抗类固醇-处理的单核细胞上清液的移动刺激作用。

5．人单核白细胞胞外释放的因子提示它可能是糖皮质激素体内抗炎作用的介质。

然而，尚未揭示STMS中该活性物质到底是什么。

HuffT．等(1995)和Heintz D．等(1994)描述涉及β-胸腺素的研究，和生物分子络合物中β-胸腺素如何与G-肌动蛋白相互作用及抑制F-肌动蛋白在高盐条件下的聚合。氧化形式的胸腺素β4是作为抑制肌动蛋白聚合反应而被披露的，然而，其抑制作用只是在高于胸腺素β4 20倍的浓度时才会出现。没有文献推断氧化胸腺素β4的任何医疗作用。事实上，文章似乎教导人们不要去考虑氧化胸腺素β4的积极作用。

US5578570(Goldstein等)公开了施用胸腺素β4治疗感染性休克的方法。然而，其中没有披露氧化胸腺素β4，也没有提示氧化胸腺素β4具有治疗感染性休克的作用。

本发明的一个目的是提供类固醇治疗的替代疗法。

本发明部分基于本发明者的观察：与嗜中性白细胞移动有关的因子是氧化形式的胸腺素β4。

本发明首先是提供氧化胸腺素β4或其生理活性变体在治疗中的应用。

代表性的氧化胸腺素β4是胸腺素β4的一种，胸腺素β4中的一个蛋氨酸残基(距N-末端6个氨基酸)(Met6)被氧化，从而该残基转化为硫氧蛋氨酸。而且，蛋氨酸残基(Met6)可进一步氧化为砜蛋氨酸，后一形式也包括在本发明之内。还可涉及(evisaged)蛋氨酸残基的其它修饰，如硫与金属络合，从而产生类似于本文描述的氧化胸腺素β4的活性形式的胸腺素β4。

氧化胸腺素β4可以通过天然胸腺素β4在氧化条件下反应而获得，例如，与过氧化氢反应形成氧化胸腺素β4。这样，首先得到天然胸腺素β4，然后将其氧化成氧化形式。