[发明专利]液体介质中天然胶原蛋白的灭菌方法、所获得的无菌天然胶原蛋白、含有所获得的无菌天然胶原蛋白的组合物和应用

权利要求书

1．由溶解和纯化的、可选地胃蛋白酶处理的非无菌胶原蛋白提取物制备胶原蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

-(ⅰ)在具有双层横向切刀的混合物中搅拌并剪切所述提取物，同时分段提高搅拌速率使其不超过10,000rpm，并将温度以2℃至10℃，最好为3℃至5℃分段提高，以便将初始的室温提高至高为受控的最大温度，最好低于50℃，然后

-(ⅱ)在液体介质中将所述提取物灭菌，其结果是获得无菌的天然形式的胶原蛋白。

2．在权利要求1中要求保护的方法，所述溶解和纯化的提取物不经胃蛋白酶处理，其特征在于，在步骤(ⅰ)中，在每个所述阶段进行所述提取物的稀释，此时所述提取物的粘度达到选定的15,000-20,000cps的高数值，而当所述最大温度为42-44℃时，让所述提取物刚好在步骤(ⅱ)之前静置。

3．在权利要求1和2的任一项中要求保护的方法，其特征在于，在步骤(ⅱ)之前，所述提取物在所述受控最大温度下通过孔隙率为0.45μ-0.22μ的膜充分过滤。

4．在权利要求1中要求保护的方法，所述溶解和纯化的提取物经胃蛋白酶处理，其特征在于，在步骤(ⅰ)中，所述最大温度达到35℃，最好达到25℃，而所述搅拌速度为1000-5000rpm，最好为2500rpm，

-分段通过至高为0.45μ的各种选定孔隙率的膜进行澄清过滤，然后

-用氯化钠进行所述滤液的差示沉淀

5．在权利要求3或4的任一项中要求保护的方法，其特征在于，在步骤(ⅱ)中，通过孔隙率为0.22μ的膜进行绝对过滤，或通过加入过乙酸将所述提取物灭菌。

6．在任一前述权利要求中要求保护的方法，其特征在于，所述方法包括在步骤(ⅱ)之前或之后的所述提取物的中和步骤。

7．在任一前述权利要求中要求保护的方法，其特征在于，所述胶原蛋白为丝状类型，最好为主要为Ⅰ型的胶原蛋白。

8．在任一前述权利要求中要求保护的方法，其特征在于，所述胶原蛋白提取物得自皮肤(dermides)、结缔组织或动物的腱，特别是得自兔皮和鸵鸟Achilles的腱。

9．天然的Ⅰ型胶原蛋白，其可以用权利要求5-8的任一项中要求保护的方法获得，其特征在于，它具有以下特征或特性：

-α₂(Ⅰ)₁/α₁(Ⅰ)₂比率为0.48-0.52

-根据欧洲药典的标准为无菌的

-总氮：17.0％-18.7％

-羟脯氨酸：12％-13.9％

-无色氨酸、氨基葡聚糖和分子量＜95,000道尔顿的多肽

-脂质＜1％

-硫灰量＜2％。

10．药用组合物和/或parapharmaceutical组合物和/或内科-外科组合物和/或眼科组合物和/或化妆品组合物，包含单独的或联合至少一种其它活性成分的在权利要求9中要求保护的胶原蛋白。

11．在前一权利要求中要求保护的组合物，其特征在于，所述其它活性成分选自凝血因子如凝血酶、抗感染剂特别是灭滴灵、抗生素特别是大环内酯如庆大霉素、糖肽如万古霉素、氟代喹诺酮如甲氟哌酸、酰基羧酸衍生物或oxicam衍生物类固醇和非类固醇消炎药、生长因子特别是骨生长因子如促生长素和表皮生长因子如EGF(表皮生长因子)、表面活性剂、增湿剂、稳定剂和维生素。

12．在权利要求10和11的任一项中要求保护的组合物的药用形式，其特征在于，其选自凝胶特别是注射用凝胶和假固体凝胶、泡沫剂、洗眼药、单层或层状海绵、粉剂、板或带、面膜、喷雾剂、薄膜、膜、片材和线，特别是用于缝合的线。

13．在权利要求9中要求保护的胶原蛋白的用途，即用于制备计划用于人类或动物机体的药物治疗和/或parapharmaceutical治疗和/或内科-外科治疗和/或眼科治疗和/或化妆品处理的组合物。