[发明专利]用于治疗肿瘤的CD40结合分子和CTL肽

说明书

发明领域

本发明涉及药物组合物中的CD40结合分子和激活CTL的肽，包括肿瘤抗原。

发明背景

许多肿瘤逃避了我们免疫系统的检测。在癌症患者中在缺失肿瘤细胞的免疫系统特异性机理中清楚地存在定量和/或定性缺陷。通过能够识别和杀伤被病毒感染或转变成癌细胞的细胞的细胞毒性T细胞(CTL)提供了这些机理之一。以前假定树突状细胞(DC)刺激T-辅助细胞，该辅助细胞依次对CTL的活化提供帮助。本发明人已证实，T-辅助细胞不直接对该CTL提供辅助信号(通过分泌IL2)，然而，该T-辅助细胞对诱导在没有T-辅助细胞的情况下能够激活CTL的还未鉴定的细胞表面和/或可溶性分子的DC提供一信号。通过该T-辅助细胞提供给该DC的该信号通过CD40L-CD40相互作用介导。这种新发现对癌症免疫疗法提供了一种极难得的机会。

当自身细胞受到病毒感染时或者当它们转变成癌细胞时，免疫系统能够杀死这些自身细胞。这种潜在危险的机理必需清楚地在严格控制之下。该免疫系统的CTL以无活性前体循环。为了将其激活，该前体T-杀伤细胞必需识别其特异的抗原肽，该抗原肽以MHC I型分子存在于专职APC上。然而，为了引发这些T细胞，该APC还必需以尤其通过共有刺激的表面分子B7.1和B7.2以及通过淋巴因子IL-12提供的固有共同刺激的前后序列呈递该抗原。

直到最近，据信需要一在相同APC上识别相同抗原的T-辅助细胞完全激活该CTL。该特异T-辅助细胞应供应例如活化该CTL所需的IL-2的细胞因子。然而，Guerder和Matzinger(J.Exp.Med.176：553(1992))提出了用于CTL活化的“特许”模型。在该模型中，暗示当T-辅助细胞在专职APC上识别其抗原时，该T-辅助细胞将对该APC传递一活化信号，结果随后能够在不需要T-辅助细胞存在的情况下激活CTL。就在不久前，已对该特许模型的分子机理进行了解释。Schoenberger等人(Nature 393：480(1998))描述了该CD40L-CD40途径在该特许模型中的作用。T-辅助细胞和DC之间通过该CD40-CD40L结合的相互作用致使该DC活化，因此使该DC能够有效地引发原初CTL。

DC通过我们身体的组织循环并以这种方式能够收集、加工和呈递抗原。收集抗原之后，它们移动到该引流淋巴结，在其中它们向该T细胞呈递抗原。众所周知，DC需要最适地被激活。静息DC仅表达普通级MHC和共同刺激的分子并且为T细胞的差的刺激物。DC能够被炎症细胞因子和细菌产物激活，这将导致MHC和共同刺激的分子正调节。DC活化成完全成熟的DC、表达最佳级MHC分子、共同刺激的分子和如IL-12的淋巴因子，这需要通过该CD40受体附加地触发这些细胞。因此，在吸收抗原位置处的炎症细胞因子和T-辅助细胞相互作用过程中的CD40L-CD40相互作用的组合致使特许该DC活化CTL的能力达到最佳。

许多肿瘤逃避特异CTL机理的免疫检测。如果在没有炎症的情况下DC富集肿瘤抗原，那么被激活的T-辅助细胞的数量可能降低至足够诱导待激活的CTL，从而诱导一适宜的抗肿瘤反应。这一观念已提示研究人员通过给药直接刺激CTL活性的例如IL-2和IL-12的细胞因子或通过给药用GM-CSF转染的肿瘤细胞加强抗原呈递来帮助该免疫系统。这些策略已满足各种仅启动的结果。

很显然，仍有很大需求寻找产生和/或提高涉及细胞和体液免疫的保护性抗肿瘤反应。发现该CD40活化途径是一种产生一级体液和细胞免疫反应的主要免疫调节途径。如上所述，在DC上的该CD40途径担负着诱导抗肿瘤CTL反应。此外，该CD40途径在巨噬细胞上的活化刺激一强的杀肿瘤活性。

发明概述

本发明包括药物组合物中的CD40结合分子和激活CTL的肽，包括肿瘤抗原。将这种组合物用于提高肽肿瘤疫苗的抗肿瘤效应，或者用于另外激活CTL，以便该激活的CTL能够起到抵抗肿瘤细胞或受感染的细胞的作用。该CD40结合分子可以包括抗体分子，及其同系物、类似物和其修饰或衍生形式，包括象Fab、(Fab′)₂和Fv的免疫球蛋白片段，以及结合在CD40上并激活该CTL反应的包括肽、低聚核苷酸、拟态肽和有机化合物的小分子。激活CTL的肽包括来自腺病毒且具有序列SGPSNTPPEI(SEQ ID NO：2)的E1A-肽和来自人乳头瘤病毒16型且具有序列RAHYNIVTF(SEQ ID NO：3)的HPV16 E7-肽。