[发明专利]拟南芥HMP－P激酶和TMP－PP酶及其在除草剂筛选中的用途

权利要求书

1．一种编码参与硫胺素生物合成的酶的核苷酸序列，其中所述酶具有HMP-P激酶活性或TMP-PP酶活性。

2．权利要求1的核苷酸序列，其中所述酶含有与示于SEQ ID NO:2的氨基酸序列相同或基本上相似的氨基酸序列。

3．权利要求1的核苷酸序列，其中所述酶含有示于SEQ ID NO:2的氨基酸序列。

4．权利要求1的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列与示于SEQ IDNO:1的核苷酸序列相同或基本上相似。

5．权利要求1的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列示于SEQ IDNO:1。

6．一种含有与权利要求1的核苷酸序列有效连接的启动子之嵌合基因。

7．一种含有权利要求7的嵌合基因之重组载体，其中所述载体能被稳定地转化入宿主细胞。

8．一种含有权利要求14的载体的宿主细胞，其中所述核苷酸序列在所述细胞中可表达。

9．一种参与硫胺素生物合成的植物蛋白质，其中所述蛋白质具有HMP-P激酶活性或TMP-PP酶活性。

10．权利要求9的蛋白质，其中所述酶含有与示于SEQ ID NO:2的氨基酸序列相同或基本上相似的氨基酸序列。

11．权利要求9的蛋白质，其中所述蛋白质含有示于SEQ ID NO:2的氨基酸序列。

12．一种鉴定待测化学品的抑制植物生长和生存能力之方法，包括如下步骤：

(a)于酶能够催化其产物合成的条件下，将第一反应混合物中具有HMP-P激酶活性或TMP-PP酶活性的酶与HMP-P激酶底物或TMP-PP酶底物混合；

(b)在相同条件下，将第二反应混合物中的待测化学品和酶与用于第一反应混合物中的底物混合，保持如在第一反应混合物中的相同时间；

(c)测定在第一和第二反应混合物中酶的活性；且

(d)当在第二反应混合物中酶的活性明显低于第一反应混合物中酶的活性时，选择待测化学品的抑制植物生长或生存能力。

13．权利要求12的方法，其中所述酶由与示于SEQ ID NO:1的核苷酸序列相同或基本上相似的核苷酸序列编码，或具有与示于SEQID NO:2的氨基酸序列相同或基本上相似的氨基酸序列。

14．权利要求12的方法，其中所述HMP-P激酶的底物是2-甲基-4-氨基-5-羟甲基嘧啶磷酸(HMP-P)。

15．权利要求12的方法，其中所述TMP-PP酶的底物是4-甲基-5-(β-羟乙基)噻唑磷酸(THZ-P)。

16．权利要求12的方法，其中所述TMP-PP酶的底物是2-甲基-4-氨基-5-羟甲基嘧啶焦磷酸(HMP-PP)。

17．权利要求12的方法，其中所述酶的活性通过测量反应混合物中产生的TMP测定。

18．一种抑制非期望植被生长的方法，包括向非期望的植被应用由权利要求12的方法鉴定的化学品的步骤。

19．一种植物、植物细胞、植物种子或植物组织，其包含编码具有HMP-P激酶活性的酶之核苷酸序列，其中所述核苷酸序列赋予植物、植物组织、植物种子或植物细胞耐受一定量的由权利要求12的方法鉴定的化学品，所述一定量为正常情况下抑制野生型植物中HMP-P激酶活性的量。

20．一种可通过如下方法获得的植物，包括用分离的DNA分子转化植物或植物的亲本，其中分离的DNA分子包含编码HMP-P激酶活性的酶之核苷酸序列，且能够在所述植物中表达核苷酸序列，从而赋予该植物对由权利要求12方法鉴定的化学品的耐受性。