[发明专利]在转化的酵母细胞中生产蛋白质的方法

权利要求书

1．不能够使细菌细胞产生抗生素抗性的重组酵母表达载体，所述的载体包括编码异源蛋白质的基因和已经通过体外修饰而成为非功能性的抗生素抗性标记基因。

2．根据权利要求1所述的重组酵母表达载体，其中所述的抗生素标记基因是AMP基因。

3．用于生产所需多肽或蛋白质的方法，该方法包括在合适的条件下培养含有权利要求1-2所述载体的酵母菌株并从培养基中分离所需产物的步骤。

4．用于生产所需多肽或蛋白质的方法，该方法包括在合适的条件下培养含有酵母表达质粒的酵母菌株的步骤，在所述的质粒中，在插入酵母宿主前已经通过体外缺失部分标记基因或整个标记基因而使用于细菌中起始克隆步骤的功能性抗生素标记基因成为非功能性的。

5．根据权利要求4所述的方法，包括在抗生素抗性标记基因周围插入合适的限制位点并通过用合适的限制酶进行的体外处理而使所述标记基因缺失的步骤。

6．根据权利要求3-5所述的方法，其中所述的酵母菌株是酵母属的菌株，优选酿酒酵母菌株。

7．含有权利要求1-2所述载体的转化酵母细胞。

8．根据权利要求7所述的转化酵母菌株，它是一种酵母属的菌株，优选酿酒酵母菌株。