[发明专利]控制禽类病原体的减毒沙门氏菌活疫苗

说明书

发明背景

本发明总地涉及用于家禽和其它鸟类的疫苗，更具体地说，涉及保护家禽或其它鸟类抵抗禽类致病性革兰氏阴性菌感染的疫苗。

相关领域描述

禽类致病性大肠杆菌(APEC)菌株在家禽和其它鸟类中引起了许多相关的疾病，包括肺泡炎、蜂窝织炎、大肠杆菌病、大肠杆菌肉芽肿、大肠杆菌败血病、Hjarre病、脐炎、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎(Gross,W.B.,in Diseases of Poultry,Calnek等人编辑，Iowa State University Press,第138-144页，1991；Messier等人，Avian Diseases 37:839-844,1993)。这些疾病和由革兰氏阴性禽类致病菌导致的其它疾病可造成饲料转化成禽体的损失率或动物的死亡率的升高，从而导致家禽产业每年几百万美元的损失。Norton,R.A.Broiler Industry,Feb.1998，第28-32页。

被沙门氏菌污染的禽体制品是沙门氏菌感染人的重要来源，将导致人的胃肠炎，因此这是一个大众关心的公共卫生问题。口服给予鼠伤寒沙门氏菌株的活细胞(该菌株在cya和crp基因上有减毒缺失)，已显示能对小鸡提供优异的抗野生型沙门氏菌攻击的保护力(Hassan等人，Res.Microbiol.141:839-850,1990；Hassan等人，Infect.Immun.62:5519-5527,1994)，并已开发出在这种菌株中稳定表达异源抗原的系统(Hone等人，Microb.Pathog.5:407-418,1998；Strugnell等人，Gene,88:57-63,1990；Galan等人，Gene 94:29-35；1990；Nakayame等人，Bio/Technology 6:639-697,1995)。

APEC菌株基本上仅有几种血清型(O1、O2、O35和O78)(Cloud等人，Avian Dis.29:1084-1093,1985,Glantz等人，Avian Dis.6:322-328,1962；Gross同上)，而家禽中最普遍的沙门氏菌血清型是B、C和D群。用所谓O-抗原结构是在分子水平测定O血清型革兰氏阴性菌(如大肠杆菌和沙门氏菌)，也称为O-特异性链或O-多糖，其通常由各种长度的聚合同种糖单元组成，这些糖单元固着于细菌外膜，作为脂多糖(LPS)分子的最外层组分(Helander等人，in MolecularBiology and Biotechnology:A Comprehensive Desk Reference,R.A.Meyers编辑，VCH Publishers,Inc.,1995)。

抗LPS O-抗原的特异性抗体己表现出在人的肠道外大肠杆菌感染的哺乳动物模型中保护作用(Cryz等人，Vaccine 13；449-435,1995；Pluschke等人,Infect.Immun.49:365-370,1985)并和已认识到LPS O-抗原可作为其它革兰氏阴性病原菌的保护性抗原(Ding等人，J.Med.Microb.31:95-102,1990；MicheRi等人，Infect.Immun.60:1786-1792,1992；Robbins等人，Clin.Infect Dis.15:346-361,1992)。另外，一些研究小组已报导了用减毒的沙门氏菌和沙门氏菌-大肠杆菌杂交菌作为几种人病原菌(包括索氏志贺氏菌、霍乱弧菌和铜绿假单胞菌)的O-抗原的疫苗送递运载体(Black等人，J.Infect.Dis.155:1260-1265,1987；Formal等人，Infect.Immun.34:746-750,1981；Pier等人，Infect.Immun.63:2818-2825,1995)；(Morona等人，美国专利号No.5,110,588)。然而，在本文所述的研究前，未曾报导过用表达APEC O-抗原的活的减毒沙门氏菌免疫接种家禽。

用大肠杆菌和沙门氏菌制得的LPS O-抗原包括脂类A、R-核心寡聚糖和O-特异性多糖(O-PS)，它们按此顺序共价连接。Sugiyama等人，J.Bacteriol.173:55-58,1991。在鼠伤寒沙门氏菌中，R-核心部分的合成是由rfa基因座和一些持家基因(如galE、galU和pgi)指导的，而O-PS的合成是由rfb基因簇(其编码参与单体糖单元生物合成的酶)和rfc基因(其编码负责糖单元聚合成大分子量多糖链的O-抗原聚合酶)指导的。Sugiyama等人，同上。