[发明专利]用于繁殖突变疱疹病毒的细胞系

权利要求书

1.繁殖在内源HSV VP16基因或其同源物上具有突变的突变疱疹病毒的方法，该方法包括用所述突变疱疹病毒感染细胞系并培养所述细胞系，

其中所述细胞系包含编码有功能的单纯疱疹病毒(HSV)VP16多肽或其同系物的核酸序列，所述核酸序列有效连接到允许所述多肽在所述细胞系中表达的控制序列；所述核酸序列(1)能够互补所述内源基因，并且(2)不能与所述内源基因发生同源重组。

2.依照权利要求1的方法，其中所述突变降低或完全消除所述内源基因激活病毒转录的能力。

3.依照权利要求2的方法，其中所述有功能的HSV VP16同源物由从牛疱疹病毒基因和马疱疹病毒基因选出的疱疹病毒基因编码。

4.依照权利要求3的方法，其中所述疱疹病毒基因是马疱疹病毒1基因12或牛疱疹病毒基因BTIF。

5.依照前面所述权利要求中任何一项的方法，其中所述控制序列包括组成型活性启动子或诱导型启动子。

6.依照前面所述权利要求中任何一项的方法，其中所述突变疱疹病毒是单纯疱疹病毒(HSV)。

7.依照权利要求6的方法，其中所述HSV是HSV-1或HSV-2。

8.依照前面所述权利要求中任何一项的方法，其中所述突变疱疹病毒包含功能性失活所述病毒的一个或多个其它内源基因的其它突变，所述细胞系包含编码有功能的疱疹病毒基因的其它核酸序列，所述其它核酸序列互补所述功能性失活的其它内源基因。

9.依照权利要求8的方法，其中所述其它核酸序列编码HSV-1ICP27和/或ICP4，或其在HSV-2或另一种疱疹病毒中的等同物。

10.依照权利要求9的方法，其中HSV-1 ICP27或其等同物由ICP27启动子驱动和/或其中HSV-1 ICP4或其等同物由MMTV LTR启动子驱动。

11.依照前面所述权利要求中任何一项的方法，所述方法还包括从所述培养的细胞系分离突变疱疹病毒并可选地纯化所述突变疱疹病毒。

12.依照权利要求11的方法，所述方法还包括将所述突变疱疹病毒与一种药学上可接受的载体或稀释剂配制成药用组合物的步骤。

13.权利要求1、3-5、8、9或10中任何一项所定义的细胞系的用途，它用于繁殖权利要求1、2、6或7中任何一项所定义的突变疱疹病毒。

14.权利要求1、3-5、8、9或10中任何一项所定义的细胞系。

15.用依照权利要求1到11中任何一项的方法获得的病毒。

16.用依照权利要求12的方法获得的药用组合物。