[发明专利]利用VEGF－C或VEGF－D基因或蛋白预防再狭窄

说明书

发明领域

本发明为防止血管狭窄和再狭窄提供了材料和方法，并且主要涉及心血管医学领域。

发明背景

在全世界，冠状动脉疾病一直是发病率和死亡率的主要原因，尤其是在美国和欧洲。对于这些疾病，经皮冠脉腔血管成形术(例如，带有或不带有冠脉内支架的气囊血管成形术)在当前是对这类疾病常用和成功的治疗方法，仅在美国每年就进行成百上千次。然而，通常在血管成形术后的6个月内，在三分之一到一半的这些血管再造中发生再狭窄。估计仅在美国每年用于再狭窄的经济费用为20亿美圆。[Feldman，et al.，心血管研究，32：194-207(1996)，在这里引入本文作为参考]，尸检和动脉粥样斑块旋切研究已经确定内膜增生是再狭窄损伤的主要组织学表现[Cerek et al.，Am JCardiol.，68：24C-33C(1991)]。

在外周血管中进行的血管成形术中，再狭窄仍然是临床上关注的问题。在进行用于心脏旁路治疗或用于外周缺血或间歇性跛足治疗的血管移植(例如移植静脉或移植动脉)之后，狭窄同样是临床上关注的问题，(例如上膝股-腘动脉旁路移植)。

在Mazur等，Texas心脏研究杂志，21：104-111(1994)中指出，再狭窄是动脉对损伤的主要应答，该损伤是由破坏内皮细胞内膜层和中层基底平滑肌细胞的经皮冠脉血管成形术引起。作者指出再狭窄过程的机制涉及由血小板、内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞分泌的多种生长因子，并且平滑肌细胞的增殖构成了其主要致病特点。按照作者的说法，已证实这些平滑肌细胞的增殖对机械和药理治疗耐受。最近，其他人已经提出平滑肌增殖在再狭窄中是否是倒数第二重要的问题。见Libby，循环研究，82：404-406(1998)。

Narins等，循环，97：1298-1305(1998)综述了冠脉内支架在防止再狭窄方面的应用及其优缺点。Debbas等，美国心脏杂志，133：460-468(1997)中讨论了为治疗支架内再狭窄在一个支架内放置支架。

Chang和Leiden，Semin.Intervent.Cardiol.，1：185-193(1996)(在此引入本文作为参考)综述了用于治疗再狭窄的体细胞基因治疗方法。Chang和Leiden指出复制缺陷型腺病毒包括一个有前途的和安全的载体系统，其直接用于再狭窄预防的基因治疗，因为这些病毒能有效地感染包括血管平滑肌在内的各种细胞；可制备高滴度的这类病毒(例如，10¹⁰-10¹²噬菌斑形成单位每毫升)；这些病毒可以接纳外源基因插入，如长度大小为7-9kb的碱基；这些病毒可经标准的导管经皮传递；而且这些病毒不整合入宿主基因组。Chang与Leiden及Feldman等，出处同上，还综述了细胞毒性和细胞抑制性基因治疗方法，其被设计用来杀死血管平滑肌细胞或抑制其增殖，这些血管平滑肌细胞被认为是形成新内膜的原因，新内膜的形成是再狭窄的特点。

Riessen和Isner，J.Am.Coll.Cardiol.，23：1234-1244(1994)(在此引入本文作为参考)综述了用于血管内药物传递的装置和用于血管内基因治疗的载体。

Cerek等，美国心脏杂志，68：24C-33C(1991)提出通过抑制生长因子介导的动脉损伤复原来预防再狭窄。其中讨论了血小板衍生生长因子(PDGF)、血小板反应蛋白、胰岛素样生长因子1(IGF-1)，成纤维细胞生长因子(FGF’s)、转化生长因子α(TGF-α)和β(TGF-β)，表皮生长因子(EGF)的潜在作用。

Isner和Asahara(国际专利申请公开号WO 98/19712，在此引入作为参考)建议通过分离患者的内皮始祖细胞并将其重新输还给患者，在血管成形术后治疗损伤的血管并加速内皮细胞重建。作者指出，应用血管内皮生长因子(VEGF)或基底成纤维细胞生长因子(bFGF)等血管发生促进性生长因子的效力，可以被负载VEGF或bFGF使其发挥作用的血管内皮细胞的缺乏所限制。

Martin等(国际专利申请公开号WO 98/20027，在此引入作为参考)建议利用VEGF基因或蛋白治疗或防止血管的狭窄或再狭窄。作者提出VEGF的任何有益作用来自于一种不同的作用机制，而不是VEGF活性中与内皮受损时刺激内皮细胞再建相关的VEGF活性为基础的机制。